淋病奈瑟菌opa基因分型研究及其流行病學(xué)應(yīng)用.pdf

1、本文論述了淋病奈瑟菌opa基因分型研究及其流行病學(xué)應(yīng)用，全文總共分三章，各章的主要內(nèi)容簡述如下： 第一章：淋病耐藥監(jiān)測。 采用紙片酸度法測定菌株是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，采用瓊脂稀釋法測定四環(huán)素、環(huán)丙沙星、大觀霉素和頭孢曲松對淋球菌的最小抑菌濃度(MIC)。對濟南、福州、南寧地區(qū)2005年收集到的379株淋球菌進行了檢測，其中濟南99株，福州200株，南寧80株。在379株淋球菌中，產(chǎn)青霉素酶淋球菌(PPNG)的陽性率為26.

2、6％；質(zhì)粒介導(dǎo)的耐四環(huán)素淋球菌(TRNG)陽性率為28.2％；耐環(huán)丙沙星淋球菌的陽性率為98.4％，僅有6株為中度敏感；未檢測出對大觀霉素耐藥的淋球菌，對頭孢曲松耐藥的淋球菌也未檢出，但敏感株陽性率僅為60.7％、中度敏感株陽性率為39.3％。由此可見，三個地區(qū)分離的淋球菌中質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性(包括PPNG和TRNG)所占比例較大，頭孢曲松和大觀霉素為治療淋病的有效藥物，但頭孢曲松敏感性下降明顯，應(yīng)嚴密監(jiān)測。 第二章淋病奈瑟菌op

3、a基因分型方法的建立與評估。 建立了淋病奈瑟菌opa基因分型方法，并對這種方法的可行性做了評估。方法的建立主要分以下幾個步驟：1.淋球菌基因組DNA模板的制備；2.淋球菌opa基因的擴增及擴增片斷檢測；3.opa基因擴增片斷的限制性酶切：包括分別進行的TaⅠ酶切和HpaⅡ酶切；4.聚丙烯酰胺凝膠電泳酶切基因片斷的分離；5.凝膠成像及成像后圖像的輸出與保存；6.用GelComparⅡ?qū)I(yè)分型軟件對所建立的方法進行評估。選取淋病患者

4、26例，17例來自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所性病科，這其中有4例來自2對兩兩之間有性接觸的性伴，剩余13例未承認他們之間有任何性接觸；9例來自山東省皮防所，這其中也有2例來自1對兩兩之間有性接觸的性伴，剩余7例也未承認他們之間有任何性接觸。26株淋球菌經(jīng)過兩種限制性內(nèi)切酶的分別酶切后，發(fā)現(xiàn)無論是用限制性內(nèi)切酶TaqⅠ還是限制性內(nèi)切酶HpaⅡ，存在性聯(lián)系的菌株之間opa基因被酶切后具有相同(100％)的長度多態(tài)性，而無任何性聯(lián)系的菌株之間

5、它們的opa基因被酶切后未發(fā)現(xiàn)具有類似相同的長度多態(tài)性。試驗中實驗室結(jié)果與患者所提供的性接觸信息完全吻合，相互印證。 第三章淋病奈瑟菌opa基因分型方法的流行病學(xué)應(yīng)用。淋病在中國是最為常見的性傳播疾病之一，了解淋病的傳播路線及方式有助于制定淋病的控制措施。本章的目的是調(diào)查中國四個不同城市opa基因型的分布狀況并考察實驗結(jié)果與臨床資料之間的一致性問題。對從南京、濟南、福州、南寧四個城市收集來的330株淋球菌進行opa基因分型，同時

6、收集相應(yīng)的臨床和流行病學(xué)資料。結(jié)果在這330株淋球菌中產(chǎn)生了309個opa type，其中292個opa type各包含一株淋球菌，17個opa type各包含兩株或以上的淋球菌。Opa基因分型方法印證了臨床資料顯示的9對性伴侶之間的接觸，另外還進一步揭示了9個opa cluster和8個silnilar pair，他們之間也存在著或近或遠的性聯(lián)系。Opa分型是一種效率極高的淋球菌基因分型方法，能夠很好的應(yīng)用于淋球菌感染的流行病學(xué)調(diào)查研