氰戊菊酯經(jīng)Tn細(xì)胞代謝前后結(jié)構(gòu)的變化.pdf

1、氰戊菊酯(Fenvalerate，(RS)-α-氰基-3-苯氧基芐基(RS)-2-(4-氯苯基)-3-甲基丁酸酯)，是一種廣泛用于農(nóng)林害蟲和疾病傳播媒介防制的II型擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。由于農(nóng)藥的長期大量使用，很多昆蟲對農(nóng)藥產(chǎn)生了抗性，使得農(nóng)藥的用量大量增加，帶來了一系列的環(huán)境問題。然而，關(guān)于昆蟲對化學(xué)殺蟲劑產(chǎn)生抗性的機(jī)制迄今仍不十分清楚。實驗室前期研究表明，經(jīng)氰戊菊酯處理過的粉紋夜蛾(Tn)的細(xì)胞系，細(xì)胞內(nèi)的P450含量增加，經(jīng)蛋白組學(xué)研

2、究顯示，這些P450中為三種羥化酶。因此假設(shè)：氰戊菊酯被Tn細(xì)胞得羥化酶催化羥基化后，使之水溶性增加，并改變了其與空間構(gòu)象，不能與細(xì)胞表面的受體結(jié)合，從而產(chǎn)生了抗藥性。本實驗?zāi)烤褪菫榱蓑炞C經(jīng)Tn細(xì)胞代謝后的氰戊菊酯的結(jié)構(gòu)是否與預(yù)測相一致。 首先用濃度為12.5μM/L的氰戊菊酯處理Tn細(xì)胞12h后，回收昆蟲細(xì)胞及其培養(yǎng)液，利用乙醚萃取法從Tn細(xì)胞及其培養(yǎng)液中提取氰戊菊酯及其衍生物，再通過硅膠柱分離純化氰戊菊酯的衍生物。經(jīng)1H-N

3、MR，13C-NMR檢測后，解析出氰戊菊酯衍生物的結(jié)構(gòu)，由質(zhì)譜分析確定氰戊菊酯衍生物的分子量，元素分析測定氰戊菊酯衍生物中的C，H，O，N含量從而對1H-NMR，13C-NMR解析出的氰戊菊酯衍生物結(jié)構(gòu)進(jìn)行確定。 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)氰戊菊酯經(jīng)Tn細(xì)胞代謝后，氰戊菊酯結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，其中氰基被還原，苯氧基被羥基所取代。 雖然，大量的研究發(fā)現(xiàn)，昆蟲對化學(xué)殺蟲劑抗性產(chǎn)生的主要機(jī)制是通過細(xì)胞內(nèi)P450酶系的解毒體系實現(xiàn)的，但研究結(jié)果卻展