小鼠氣道重塑模型中NF-κB通路與角質(zhì)細胞生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子相關(guān)作用研究.pdf

1、目的:丙烯醛霧化吸入6周建立小鼠氣道重塑模型，研究NF-кB易位抑制劑咖啡酸苯乙酸酯(CAPE)與槲皮素對小鼠氣道重塑的干預(yù)作用；同時探討NF-кB/TGF-β1參與氣道重塑調(diào)控的分子機制以及內(nèi)源性角質(zhì)細胞生長因子(KGF)和TGF-β1的相互作用對氣道重塑的保護效應(yīng)。 方法:正常雄性C57BL/6小鼠96只隨機分為8組(每組6只)：正常對照組，槲皮素組(腹腔注射槲皮素0.2g/kg，隔日一次)，CAPE組(腹腔內(nèi)注射CAPE

2、30 mg/kg，隔日一次)、二甲亞砜空白溶劑對照組(腹腔注射DMSO 0.1ml，隔日一次)，丙烯醛組(丙烯醛霧化吸入2 h×3次/d，共6周)，丙烯醛+槲皮素組(霧化吸入丙烯醛同時腹腔內(nèi)注射槲皮素)，丙烯醛霧化+CAPE組(霧化吸入丙烯醛同時腹腔內(nèi)注射CAPE)。于實驗第二、第六周處死小鼠后采取肺組織和支氣管肺泡灌洗液(BALF)。肺組織HE、MASSON染色和羥脯氨酸定量觀察氣道平滑肌增生、氣道上皮下及管周肺組織膠原沉積以及小鼠氣

3、道及管周肺組織的纖維化情況；ELISA測定BALF中IL-1α、TGF-β1、IFN-γ含量；免疫組化、Westernblot及RT-PCR方法檢測 KGF，TGF-β1，NF-кB，I-кB，Smad7的表達。 結(jié)果:(1)丙烯醛組小鼠氣道炎癥反應(yīng)，氣道平滑肌增生及氣道上皮下膠原沉積較正常對照組顯著增加(P<0.05)；(2)槲皮素與CAPE干預(yù)后氣道炎癥及管周平滑肌增生，上皮下基底膜沉積較丙烯醛組明顯減輕(P<0.05)；(

4、3)丙烯醛組支氣管管周與肺組織NF-кB陽染和入核率顯著增高，槲皮素與CAPE干預(yù)減少NF-кB陽染(P<0.05)；I-кB陽染丙烯醛組較正常對照組明顯減少(P<0.05)；槲皮素和CAPE干預(yù)后增加了I-кB的表達(P<0.05)；(4)SMAD7免疫組化染色丙烯醛組較正常組明顯減少，在槲皮素和CAPE干預(yù)后表達增強(P<0.05)；TGF-β1的mRNA在丙烯醛組顯著增加，槲皮素和CAPE可減少TGF-β1在氣道重塑中的表達(P<

5、0.05)；(5)KGF免疫組化染色和mRNA在槲皮素與CAPE干預(yù)組的表達較丙烯醛組均明顯增加(P<0.05)；(6)氣道與支氣管上皮組織NF-кB蛋白表達與肺泡灌洗液中IL-1α、TGF-β1有顯著正相關(guān)，與IFN-γ有顯著負相關(guān)；KGF mRNA的表達與TGF-β1有顯著負相關(guān)性，KGF在氣道重塑中的保護作用可能通過阻斷NF-кB通路聯(lián)合其他信號途徑起保護作用。 結(jié)論:丙烯醛霧化吸入六周可導(dǎo)致小鼠氣道慢性炎癥損傷和進而氣道