椎旁注射阿霉素對大鼠感覺和運(yùn)動功能影響的實驗研究.pdf

1、阿霉素(adriamycin，ADM)原是一種抗癌藥，廣泛應(yīng)用于惡性腫瘤的治療。但由于它明顯的細(xì)胞毒性和神經(jīng)毒性，可以引起周圍神經(jīng)變性，所以在動物實驗中也將它作為經(jīng)典的神經(jīng)毒物，臨床上應(yīng)用它來損毀背根神經(jīng)節(jié)(dorsal rootganglion，DRG)細(xì)胞作疼痛治療，也就是選擇性痛覺神經(jīng)節(jié)化學(xué)切除術(shù)以治療難治性疼痛<'[1]>脊髓DRG是感覺及傷害信息傳入的重要門戶，是痛覺傳入的第一級神經(jīng)元，傷害性刺激在此處進(jìn)行換能，轉(zhuǎn)變成電信號，

2、經(jīng)脊髓、腦干和丘腦的傳遞和調(diào)制，最后在大腦皮層產(chǎn)生痛覺。DRG擁有多種感覺細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞大小不同而功能各異，小細(xì)胞(直徑18～30μm)感受傷害性神經(jīng)沖動，大細(xì)胞(直徑>45μm)接受本體感覺和觸壓覺<'[2]>。 國內(nèi)臨床上已經(jīng)開展了0.33％阿霉素做胸椎及頸椎旁神經(jīng)阻滯來治療難治性帶狀皰疹后遺痛(PHN)和癌性疼痛，臨床上已經(jīng)取得了較為滿意的治療效果，但是還需要進(jìn)一步研究它對運(yùn)動神經(jīng)損害情況。 目的： 在大鼠

3、椎旁注射0.33％、0.5％、1％的阿霉素后，觀察藥物對同側(cè)背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及坐骨神經(jīng)的電生理和病理方面的影響，以及藥物對大鼠的肌力和運(yùn)動狀態(tài)方面的影響，探討阿霉素能否選擇性切斷痛覺傳導(dǎo)通路而不出現(xiàn)大鼠的運(yùn)動障礙。 方法： 健康雄性Wister大鼠80只，體重250～300g，隨機(jī)分為4組：0.33％阿霉素組(N1=20)：0.5％阿霉素組(N2=20)：1％阿霉素組(N3=20)：生理鹽水對照組(N4=20)。大鼠腹腔注

4、射3％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉，無菌條件下暴露大鼠右側(cè)L4、L5椎間孔外緣，然后在組1、組2、組3分別注射0.33％、0.5％、1％阿霉素溶液10μ1。在給藥后的1、2、4、8周每組隨機(jī)選取5只大鼠，分別用BL-420E生物機(jī)能實驗系統(tǒng)和TF-2光熱測痛儀測量大鼠注藥側(cè)的脊髓運(yùn)動誘發(fā)電位、腦皮層感覺誘發(fā)電位、坐骨神經(jīng)運(yùn)動和感覺傳導(dǎo)速度以及大鼠對應(yīng)側(cè)的足底熱痛和電擊痛潛伏期，并對大鼠的行為狀態(tài)和肌力按照改良的Tarlove’s分級

5、法進(jìn)行評定。在測量完畢后，分別在2、4周隨機(jī)取大鼠右側(cè)的L4、L5背根神經(jīng)節(jié)及坐骨神經(jīng)做成標(biāo)本制成石蠟切片，進(jìn)行HE染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察阿霉素椎旁注射后，相對應(yīng)的背根神經(jīng)節(jié)及坐骨神經(jīng)的組織學(xué)變化。N4組同樣在大鼠的右側(cè)L4、L5椎間孔注射生理鹽水10μl作為對照組。 結(jié)果： 1．大鼠行為狀態(tài)和肌力的改變所有的動物在測量前均無運(yùn)動障礙和痛敏表現(xiàn)，術(shù)后傷口愈合良好，無感染征象。1％濃度組1～8周，大鼠出現(xiàn)右后肢不同程度的

6、運(yùn)動功能障礙，根據(jù)改良的Tarlore’s分級法進(jìn)行后肢肌力評分均明顯低于對照組。0.5％濃度組有11％(2/19)的大鼠出現(xiàn)明顯的后肢運(yùn)動障礙，0.33％濃度組在8w時有5％(1/20)的大鼠出現(xiàn)后肢運(yùn)動障礙，且這兩個濃度組在1～8w各個時間點(diǎn)評分與對照組無統(tǒng)計學(xué)意義。 2．熱痛和電擊痛閾的測定結(jié)果1％濃度組在1～8周可觀察到大鼠熱痛以及電擊痛閾值明顯增高與對照組有顯著性差異(P<0.05)。1周時，0.5％、0.33％兩個濃

7、度組的大鼠出現(xiàn)注藥側(cè)的熱痛和電擊痛閾不同程度的降低，2～8周時閾值則明顯升高，與對照組有明顯差異(P<0.05)。 3．坐骨神經(jīng)運(yùn)動和感覺傳導(dǎo)速度的改變1％濃度組大鼠的坐骨神經(jīng)的運(yùn)動和感覺傳導(dǎo)速度在1～8周明顯降低，組間比較有明顯差異(P<0.05)。0.5％和0.33％濃度組的運(yùn)動和感覺傳導(dǎo)速度，跟對照組無明顯差異(P>0.05)。 4．脊髓運(yùn)動誘發(fā)電位的改變1％濃度組在1～8周，大鼠的MEP潛伏期明顯延長，波幅降低，

8、組間比較有顯著性差異(P<0.05)。而0.5％、0.33％濃度組在1～8周，與生理鹽水對照組的MEP潛伏期和波幅無明顯組間差別(P>0.05)。 5．大鼠皮層感覺誘發(fā)電位的改變1％濃度組的大鼠1～8周時，SEP出現(xiàn)潛伏期明顯延長，波幅降低，組間比較有顯著性差異(P<0.05)。0.5％、0.33％濃度組1周時SEP波幅有明顯增加，組間比較有差異(P<0.05)，而潛伏期則無明顯改變與對照組組間無差異(P>0.05)，2～8周S

9、EP的波幅和潛伏期組間比較都無差別(P>0.05)。 6．組織病理變化1％濃度組的大鼠DRG第2、4周均可見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞壞死，4周時壞死更加明顯，且有明顯膠質(zhì)細(xì)胞及結(jié)締組織明顯增生取代壞死的DRG細(xì)胞。生理鹽水對照組無明顯病理變化。0.5％濃度組的大鼠DRG在第2、4周可見大量神經(jīng)細(xì)胞變性改變，且在4周時有明顯的壞死改變。0.33％濃度組2周時，可見背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞腫脹、尼氏小體減少或消失；4周時，可見神經(jīng)細(xì)胞核固縮胞漿均質(zhì)化和細(xì)胞

10、壞死。 1％濃度組2、4周可見到坐骨神經(jīng)髓鞘大部分崩解，遺留壞死輪廓，軸突腫脹或者消失，神經(jīng)內(nèi)膜、神經(jīng)束膜和神經(jīng)外膜不連續(xù)或者消失。0.33％、0.5％濃度組的大鼠2、4周跟生理鹽水對照組無明顯病理變化：神經(jīng)纖維大中基本一致，軸突位于中央，較小，呈星狀。 結(jié)論： 大鼠椎旁注射1％ADM組不但可明顯損毀大鼠痛覺，而且能夠損傷脊髓運(yùn)動運(yùn)動神經(jīng)元，由于這個濃度可以導(dǎo)致大鼠后肢的自主運(yùn)動喪失或減少，坐骨神經(jīng)的傳導(dǎo)速度減慢，誘發(fā)電