吲哚胺2，3-雙加氧酶在結(jié)腸癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、1.研究背景及目的 結(jié)腸癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，在可切除的結(jié)腸癌患者中，大約50﹪患者將會(huì)復(fù)發(fā)，其中絕大部分患者失去再治愈的機(jī)會(huì)。因此，需要新型治療策略來(lái)改善患者的預(yù)后。免疫治療具有腫瘤特異性、免疫記憶性以及對(duì)重要臟器無(wú)明顯毒性等特點(diǎn)，可以長(zhǎng)期、反復(fù)使用，是一種理想的鞏固維持治療方法。但是，腫瘤與免疫的關(guān)系非常復(fù)雜，有必要分析和干預(yù)影響免疫效應(yīng)的關(guān)鍵因素，使免疫治療更合理。 吲哚胺2，3-雙加氧酶(id01eami

2、ne 2，3-dioxygenase，IDO)是近年來(lái)研究較熱的因子之一。目前證實(shí)，其與腫瘤免疫耐受的關(guān)系非常密切。IDO是肝臟以外唯一可催化色氨酸沿犬尿酸途徑分解代謝的限速酶。色氨酸是細(xì)胞維持活化和增殖所必需的氨基酸，同時(shí)也是合成蛋白質(zhì)不可缺少的重要成分，色氨酸的缺乏可使細(xì)胞功能受限，而色氨酸的代謝是受IDO調(diào)控的。編碼IDO的基因啟動(dòng)子區(qū)含有2個(gè)干擾素刺激反應(yīng)元件(interfeton-stimulated resporlse el

3、ement，ISRE)，因此干擾素(interferon，IFN)能強(qiáng)烈的誘導(dǎo)ID0的表達(dá)，其他的一些因子如IL-1、IL-2、TNF-α、GM-CSF、LPS等也可通過(guò)直接或間接的方式上調(diào)IDO的表達(dá)。而另外的一些因子如I-MT、NO、IL-4、TGF-β等則對(duì)IDO的表達(dá)具有下調(diào)作用。大量的研究證實(shí)，IDO具有抑制腫瘤特異性T淋巴細(xì)胞的反應(yīng)性，誘導(dǎo)腫瘤免疫耐受的作用。人類的多種腫瘤細(xì)胞及腫瘤相關(guān)的某些免疫細(xì)胞中存在IDO的表達(dá)。然而

4、，對(duì)于究竟是IDO<'+>的腫瘤細(xì)胞自身還是腫瘤相關(guān)的免疫細(xì)胞(如抗原提呈細(xì)胞)或兩者均參與了腫瘤免疫耐受的形成，在不同的腫瘤中得到的結(jié)果并不一致。 Binl(bridging integrator protein-1)是一種分布廣泛的具有抑癌特性的配體蛋白。在多種惡性腫瘤細(xì)胞系和原發(fā)性腫瘤中發(fā)現(xiàn)，Binl表達(dá)下調(diào)往往伴隨有ID0的過(guò)表達(dá)。研究證實(shí)，Binl具有抑制STAT1和INF-κ B依賴性IDO表達(dá)的作用，敲除Binl基因后，突

5、變的細(xì)胞可通過(guò)過(guò)表達(dá)的IDO來(lái)逃避機(jī)體的抗腫瘤免疫而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。 目前，國(guó)內(nèi)外有關(guān)IDO與結(jié)腸癌關(guān)系的研究很少，本研究的目的即通過(guò)免疫組化的方法觀察IDO和Binl在結(jié)腸癌中的表達(dá)情況，初步探討IDO在結(jié)腸癌免疫耐受中可能起到的作用，為結(jié)腸癌免疫治療提供一定的理論依據(jù)。 2．實(shí)驗(yàn)方法 收集110例結(jié)腸癌患者的成套石蠟組織標(biāo)本(包括原發(fā)灶、癌旁正常結(jié)腸組織和區(qū)域淋巴結(jié))進(jìn)行IDO和Binl的免疫組織化學(xué)染色，觀

6、察IDO和Binl在結(jié)腸癌原發(fā)灶、癌旁正常結(jié)腸上皮組織及區(qū)域淋巴結(jié)的表達(dá)情況。從病案室收集患者臨床資料和隨訪資料，進(jìn)一步分析IDO的表達(dá)與Binl和患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。 3．結(jié)果 3．1 IDO和Binl在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)IDO和Binl主要表達(dá)于其陽(yáng)性細(xì)胞的胞漿中，兩者在結(jié)腸癌原發(fā)灶、癌旁正常結(jié)腸上皮組織以及IDO在區(qū)域淋巴結(jié)中均呈強(qiáng)弱不等的表達(dá)。在未轉(zhuǎn)移的區(qū)域淋巴結(jié)中IDO陽(yáng)性細(xì)胞的形態(tài)類似于樹突細(xì)胞。

7、 3．2 IDO和Binl在結(jié)腸癌患者不同組織部位的差異表達(dá)在110例結(jié)腸癌標(biāo)本中，有癌旁正常結(jié)腸上皮組織的71例，與相應(yīng)的71例結(jié)腸癌原發(fā)灶相比，IDO和Binl在兩種組織中的表達(dá)均無(wú)明顯差異(P=0.936和P=0.350)。在上述110例成套的結(jié)腸癌標(biāo)本中存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的共41例。在這41例區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中，IDO均為缺失或弱表達(dá)，與相應(yīng)的41例原發(fā)灶相比，IDO在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)下調(diào)(P=0.020)。 3．

8、3原發(fā)灶中Binl與IDO表達(dá)的相關(guān)性分析及兩者與患者臨床病理特征的關(guān)系在110例結(jié)腸癌原發(fā)灶中Binl與IDO的表達(dá)無(wú)明顯的相關(guān)性(Rs=0.148，P=0.122)，兩者的表達(dá)強(qiáng)弱與結(jié)腸癌患者的性別、年齡、腫瘤T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移之間亦無(wú)明顯的相關(guān)性。 3．4多因素COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析通過(guò)時(shí)間依賴性多因素COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析得，除了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移外，未轉(zhuǎn)移區(qū)域淋巴結(jié)中IDO強(qiáng)表達(dá)也是結(jié)腸癌患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)

9、因素，而年齡、性別、腫瘤T分期及原發(fā)灶中IDO和Binl的表達(dá)強(qiáng)弱與結(jié)腸癌患者的預(yù)后無(wú)明顯的相關(guān)性。 3．5 Kaplan-Meier生存分析通過(guò)Kaplan-Meier生存分析得未轉(zhuǎn)移區(qū)域淋巴結(jié)中平均每高倍視野IDO<'+>細(xì)胞數(shù)≤50的患者平均生存時(shí)間和5年生存率均明顯高于IDO<'+>細(xì)胞數(shù)>50的患者(P<0.05)。而原發(fā)灶中IDO和Binl的表達(dá)強(qiáng)弱與患者的平均生存時(shí)間和5年生存率無(wú)明顯的相關(guān)性。 4．結(jié)論

10、 本文觀察到，在結(jié)腸癌細(xì)胞向區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中，腫瘤細(xì)胞在下調(diào)表達(dá)IDO的同時(shí)，未轉(zhuǎn)移區(qū)域淋巴結(jié)中出現(xiàn)較多IDO陽(yáng)性細(xì)胞。這些結(jié)果提示，在結(jié)腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中IDO可能具有雙重效應(yīng)：一方面腫瘤細(xì)胞通過(guò)下調(diào)表達(dá)IDO，減少微環(huán)境中色氨酸消耗，從而有利于其自身的增殖；在另一方面，腫瘤細(xì)胞通過(guò)間接因素誘導(dǎo)免疫細(xì)胞表達(dá)IDO，使區(qū)域淋巴結(jié)處于免疫抑制狀態(tài)，便于腫瘤細(xì)胞在淋巴結(jié)種植。因此，在臨床工作中應(yīng)注意細(xì)胞因子誘導(dǎo)IDO表達(dá)所產(chǎn)生的生