抗淋巴細胞血清聯合他克莫司誘導腎移植免疫耐受的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 目前，器官移植已經成為終末期器官功能衰竭患者的有效治療手段，但長期使用免疫抑制劑可引起許多不良反應，而且免疫抑制劑無助于移植慢性排斥反應和移植物的長期存活。器官移植后最理想的措施是針對供體移植物建立特異性免疫耐受，因此，如何誘導供體特異性移植耐受成為解決器官移植排斥反應的最佳手段，也成為臨床器官移植免疫學研究的熱點領域及主要目標之一。本研究通過大鼠腎臟移植受體輸注抗淋巴細胞血清后對移植腎的影響，進行抗淋巴細胞血清聯

2、合免疫抑制劑誘導免疫耐受的研究。
　　 方法一：
　　 建立一種新的簡便的大鼠腎臟移植模型：采用支架導管連接固定代替血管吻合和輸尿管膀胱瓣皮膚造瘺的方法(修剪兩段長約0.8cm的3F導管作為支架，分別將其置入供受體腎動靜脈斷端后固定，行輸尿管膀胱瓣皮膚造瘺)。
　　 結果一：
　　 共施行大鼠腎移植30例，1例因麻醉過量呼吸抑制于術中死亡，2例因游離受體腎靜脈時損傷血管導致大出血死亡，3例因動脈吻合口血栓

3、形成導致手術失敗，2例因靜脈吻合口血栓形成導致手術失敗，剩余22例術后5～10d死亡(存活5d以上視為成功)，手術成功率為73.3％。
　　 方法二：
　　 聯合應用抗淋巴細胞血清(ALS)與他克莫斯(FK506)誘導免疫耐受：受體Wistar大鼠共32只分為4組，各組樣本量8只。A：正常對照組(僅行腎移植)；B：ALS+腎移植；C：FK506+腎移植組；D：ALS+FK506+腎移植。(ALS組)：移植手術前1天腹腔注

4、射ALS，劑量1ml/kg，以后每天1次，連續(xù)應用至術后第10天；(FK506組)：移植手術前1天開始應用FK506，劑量0.5mg/kg，每天1次，連續(xù)應用至術后第10天；(ALS+FK506組)：聯合使用ALS與FK506，方法同前。觀察各組大鼠的存活時間，監(jiān)測血清肌酐濃度，并進行移植腎彩色多普勒超聲。移植物病理學檢查，在光鏡下觀察各組移植物淋巴細胞浸潤和組織結構的變化。采用遲發(fā)性超敏反應(DTH)法檢測存活大鼠的免疫耐受狀態(tài)。

5、r>　　 結果二：
　　 1.受者存活時間：D組平均存活時間為37d，與A組比較，差異有統計學意義(P<0.01)。D組平均存活時間與B組及C組比較，差異均有統計學意義(P<0.01)。
　　 2.移植腎功能測定：A組術后3d切除自體腎臟后，血清肌酐濃度迅速上升；B組及C組血清肌酐濃度呈現緩慢上升趨勢，D組移植腎功能基本保持穩(wěn)定，術后30天出現緩慢上升。
　　 3.移植腎病理學觀察結果：術后1周正常對照組移植腎

6、腎間質水腫，并有淋巴細胞浸潤，腎小管上皮細胞變性壞死、脫落，血管內皮細胞腫脹，并可見微血栓形成。術后10天抗淋巴細胞血清(ALS)+腎移植組和FK506+腎移植組未見急性排斥反應，見少量淋巴細胞浸潤，血管內皮細胞腫脹不明顯。同期ALS+FK506+腎移植組未見明顯淋巴細胞浸潤，無急性排斥反應改變，腎小管上皮細胞未見變性壞死、脫落。ALS+FK506+腎移植組在移植后25天進行移植腎病理檢查，發(fā)現腎間質有少量淋巴細胞浸潤，腎小球基底膜稍增

7、厚，但無微血栓形成，無明顯急性排斥反應表現。
　　 4.移植腎彩色多普勒超聲檢測：術后1周檢查A組移植腎血供差，平均阻力指數0.80±0.06；B組和C組移植腎血供良好，平均阻力指數分別為0.80±0.06、0.63±0.08；D組移植腎血供良好，平均阻力指數0.61±0.04。A組與D組相比較，P<0.05，差別明顯。
　　 術后20天檢查D組移植腎血供良好，平均阻力指數0.62±0.03；術后35天檢查D組移植腎血供

8、差，平均阻力指數0.78±0.07。D組術后1周與術后35天比較，P<0.05，差別明顯。
　　 5.遲發(fā)型超敏反應(DTH)：A組Wistar大鼠對SD大鼠脾細胞抗原的DTH非常明顯，5只實驗小鼠的右后足掌發(fā)紅及腫脹明顯，以兩足掌厚度之差(mm)表示的DTH指數為0.44±0.05。第2、第3組和第4組8只Wistar大鼠DTH反應引起的足掌腫脹明顯減輕，其DTH指數分別為0.24±0.05、0.25±0。06和0.22±0.