滋養(yǎng)細(xì)胞在妊娠免疫耐受中作用機(jī)制的研究——調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞免疫.pdf

1、妊娠是一種特殊的Th2現(xiàn)象。正常妊娠時(shí)，母體的Th2型免疫應(yīng)答占優(yōu)勢(shì)，Th1型免疫受到抑制，使Th1/Th2平衡向Th2漂移。在母胎界面，Th2型細(xì)胞因子白介素(IL)-4和IL-10水平的升高有利于妊娠，而Th1型細(xì)胞因子IL-2、干擾素(IFN)-γ和腫瘤壞死因子(TNF)-α的增加與妊娠失敗如流產(chǎn)、子癇前期關(guān)系密切。然而，參與Th2型免疫優(yōu)勢(shì)建立的機(jī)制至今仍不明確。
　　 先前的研究表明胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞抑制T淋巴細(xì)胞的免疫應(yīng)答

2、。吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)介導(dǎo)的色氨酸降解是機(jī)制之一，我們還發(fā)現(xiàn)了滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生548種蛋白質(zhì)，其中包括11種具有抑制Th1型免疫或/和增強(qiáng)Th2型免疫效應(yīng)的。本文的發(fā)現(xiàn)表明滋養(yǎng)細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)活性，滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物參與滋養(yǎng)細(xì)胞抑制T淋巴細(xì)胞活性的作用，并且這些具有免疫調(diào)節(jié)活性的物質(zhì)可能抑制Th1免疫并增強(qiáng)Th2免疫，從而可能參與母胎界面Th2型免疫優(yōu)勢(shì)的建立。
　　 妊娠免疫耐受機(jī)制是復(fù)雜多樣的。最近的研究表明，Th17免疫與

3、人正常妊娠的建立存在相關(guān)性，Th17細(xì)胞，即分泌IL-17的Th細(xì)胞，是不同于Th1和Th2的CD4+細(xì)胞亞群，參與多種炎癥反應(yīng)、自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展。關(guān)于Th17免疫的研究是來(lái)自小鼠的，而人類(lèi)IL-17作用的研究頗少。因此，Th17免疫是否參與人類(lèi)母胎免疫耐受還未見(jiàn)研究。
　　 目的：本研究旨在探討滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)T淋巴細(xì)胞細(xì)胞因子產(chǎn)生和平衡的影響，以及滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)T淋巴細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子的影響。
　　 材料和方法：分離早

4、孕胎盤(pán)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞，經(jīng)72小時(shí)培養(yǎng)后，收集滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)上清液為滋養(yǎng)細(xì)胞條件培養(yǎng)基，供淋巴細(xì)胞培養(yǎng)用。分離健康未孕婦女的外周血單個(gè)核細(xì)胞，用人T細(xì)胞富集柱純化CD3+T淋巴細(xì)胞。以佛波酯(PMA)刺激T淋巴細(xì)胞，酶聯(lián)免疫吸附分析法測(cè)定淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子濃度(IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10和IL-17)，實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞中Th1、Th2和Th17免疫特異性轉(zhuǎn)錄因子水平(T-bet、STAT-4、

5、GATA-3、STAT-6和RORC)。
　　 結(jié)果：
　　 1、滋養(yǎng)細(xì)胞條件培養(yǎng)基顯著減少T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2(P=0.009)、IFN-γ(P=0.02)和TNF-α(P=0.003)，T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-4(P=0.49)和IL-10(P=0.47)無(wú)顯著性差異，而Th1/Th2(IL-2/IL-4、IFN-γ/IL-4、TNF-α/IL-4、IL-2/IL-10、IFN-γIL-10和TNF-α/IL-10)顯

6、著降低；滋養(yǎng)細(xì)胞條件培養(yǎng)基顯著抑制T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-17(P=0.0001)。
　　 2、滋養(yǎng)細(xì)胞條件培養(yǎng)基顯著降低T淋巴細(xì)胞Th1特異性轉(zhuǎn)錄因子STAT-4(P=0.006)的表達(dá)，顯著增強(qiáng)Th2特異性轉(zhuǎn)錄因子STAT-6(P=0.02)和GATA-3(P=0.0028)表達(dá)；但對(duì)Th1特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet(P=0.96)、Th17特異性轉(zhuǎn)錄因子RORC(P=0.35)無(wú)顯著性影響。
　　 結(jié)論：滋養(yǎng)細(xì)胞主要通過(guò)