雌激素對卒中后抑郁大鼠神經(jīng)再生的作用.pdf

1、目的:
　　在卒中后抑郁(Post-stroke depression，PSD)實(shí)驗(yàn)大鼠模型的基礎(chǔ)上，探討雌激素對PSD實(shí)驗(yàn)大鼠模型行為學(xué)的劑量相關(guān)性;觀察雌激素對卒中后抑郁大鼠模型側(cè)腦室室下區(qū)(Subventricularzone，SVZ)神經(jīng)元再生的作用及探討劑量的相關(guān)性。
　　方法:
　　選取60只Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠，預(yù)飼養(yǎng)2周，進(jìn)行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)(Ovariectomy surgery

2、，OVX)。1周后線栓法制作短暫性大腦中動脈栓塞模型（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）。孤養(yǎng)，給予不可預(yù)見的慢性溫和刺激(Chronic unpredictable mild stress，CUMS)14天，大腦中動脈栓塞術(shù)前及不可預(yù)見慢性溫和刺激后通過曠場實(shí)驗(yàn)及糖水偏好實(shí)驗(yàn)觀察造模大鼠行為學(xué)改變，評估PSD造模是否成功。將大鼠隨機(jī)分組:對照組（OVX組）和PSD模型組(PSD組)。對照組常規(guī)

3、飼養(yǎng);PSD組再依據(jù)雌激素干預(yù)劑量分為5亞組:雌激素0μg組（0μg組）、雌激素1μ組（1μg組）、雌激素10μg組（10μg組）、雌激素25μg組（25μg組）、雌激素100μg組（100μg組）。PSD造模后，大鼠皮下注射0.1mL（含0、1、10、25、100μg）β-雌二醇的大豆油，每日1次。雌激素干預(yù)2周后給予行為學(xué)測試（曠場實(shí)驗(yàn)、糖水偏好實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)），觀察（0、1、10、25、100μg）雌激素對卒中后抑郁大鼠模型抑

4、郁樣行為的影響。處死大鼠前2h，腹腔注射5-溴-2'-脫氧尿苷(5-Bromo-2'-deoxyuridine，BrdU，50 mg·kg-1)。應(yīng)用普通及熒光免疫組織化學(xué)方法探討側(cè)腦室(SVZ)神經(jīng)元再生的劑量相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　1、行為學(xué)測定:
　　(1) PSD造模完成后，與對照組相比，PSD組曠場試驗(yàn)水平運(yùn)動(P＜0.05)及垂直運(yùn)動(P＜0.05)活動減少;PSD組大鼠糖水?dāng)z入量降低，糖水偏好度差異顯著

5、(P＜0.01);慢性刺激后強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)中PSD組掙扎時間縮短(P＜0.01)。說明PSD造模成功。
　　(2)雌激素干預(yù)后行為學(xué)測定
　?、偬撬枚葘?shí)驗(yàn)
　　與雌激素0μg組比較，經(jīng)過雌激素干預(yù)2周后，1μg組糖水偏好度接近于0μg組水平(P＞0.05)。10μg和25μg雌激素干預(yù)后糖水?dāng)z入較0μg組增多，偏好度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。100μg組大鼠糖水偏好度增加，但與0μg組比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

6、P＞0.05)。
　?、跁鐖鰧?shí)驗(yàn)
　　水平運(yùn)動評分:PSD大鼠藥物治療后，雌激素1μg組、10μg組、25μg組和100μg組水平活動評分比0μg組有上升，但1μg組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P＞0.05)。10μg組、25μg組100μg組水平活動評分明顯上升(P＜0.05)。
　　垂直運(yùn)動評分:與0μg組相比較，10μg組和100μg組垂直活動評分增加(P＜0.05)，但1μg、25μg組增加無明顯差異(P＞0.05)。

7、>　　③強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)
　　掙扎時間:與0μg組比，雌激素1μg干預(yù)組掙扎時間無明顯變化。10μg組掙扎時間延長(P＜0.05)。25μg和100μg雌激素治療后，大鼠掙扎時間較0μg組無顯著差異（P＞0.05）。
　　2、血清雌激素水平測定
　　雌激素干預(yù)2周后，0μg組血清雌激素濃度為（164.7±17.94 pmol·L-1）與對照組無明顯區(qū)別;大鼠1μg組血清雌激素濃度為（239.7±14.79 pmol·L-1

8、）處于生理低劑量水平;10μg組濃度為（554.3±21.22 pmol·L-1）是雌激素生理劑量水平;25μg組血清雌激素濃度為（1269±49.50 pmol·L-1）處于生理高劑量水平;100μg組濃度為（3395±393.6 pmol·L-1）血清雌激素遠(yuǎn)超生理劑量。
　　3、SVZ區(qū)神經(jīng)元再生
　　SVZ區(qū)BrdU標(biāo)記后免疫組化結(jié)果顯示，與對照組比，小劑量雌激素（0μg或1μg）干預(yù)，BrdU陽性細(xì)胞數(shù)無顯著差別(

9、P＞0.05)。雌激素10μg組和25μg組細(xì)胞數(shù)目較雌激素0μg組增多明顯(P＜0.01，P＜0.05)。雌激素100μg組BrdU標(biāo)記細(xì)胞數(shù)增多但較0μg組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　熒光免疫組化結(jié)果表明，SVZ區(qū)有BrdU及微管相關(guān)蛋白(Doublecortin，DCX)共表達(dá)的細(xì)胞。與0μg組相比，雌激素10μg組SVZ區(qū)BrdU及DCX共陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.在P