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文檔簡介
1、目的:研究大鼠彌漫性軸索損傷及Nogo受體抑制劑NEP1-40干預(yù)后大鼠腦組織中NgR和GAP-43蛋白的表達(dá)變化,探討Nogo受體抑制劑在大鼠彌漫性軸索損傷后對其腦組織的促神經(jīng)再生作用。
方法:將重量在250-300g的S-D健康大鼠隨機分為5組:即正常對照組,假手術(shù)組(側(cè)腦室注射25μl生理鹽水),DAI模型組,治療1組(側(cè)腦室注射25μlNEP1-40),治療2組(側(cè)腦室注射50μlNEP1-40)。每組分為1天、3
2、天、7天和14天共4個時間點,每個時間點的大鼠數(shù)目為5只。正常對照組大鼠不予處理,DAI模型組和治療組大鼠利用自由落體撞擊裝置對其實施頭部撞擊致傷,假手術(shù)組大鼠進(jìn)行同樣的撞擊前的手術(shù)及準(zhǔn)備,但不予以致傷。側(cè)腦室注射給藥后,到預(yù)定時間點處死大鼠,利用HE染色觀察大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)病理改變和免疫組化染色檢測神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)NgR和GAP-43蛋白表達(dá)的變化,并進(jìn)行比較分析。
結(jié)果:
1.組織病理學(xué)變化:HE染色顯示
3、正常對照組與假手術(shù)組的大鼠腦組織結(jié)構(gòu)清晰,均勻致密。DAI模型組的大鼠大腦皮層、腦干等部位可見局灶性點狀出血,大腦皮層腦組織水腫,神經(jīng)元變性萎縮。治療組與DAI模型組相比,傷后腦組織腫脹明顯較輕,神經(jīng)元變性也少。治療2組較治療1組改善更明顯。
2.DAI模型大鼠腦內(nèi)NgR蛋白的表達(dá)水平在頭部損傷后明顯下降,在傷后第3天降到最低,此后逐漸恢復(fù),到第7天基本恢復(fù)傷前水平,但之后逐漸升高,14天后表達(dá)水平較前明顯增高,且高于同時
4、段正常對照組及假手術(shù)組。治療組大鼠腦內(nèi)NgR陽性蛋白的表達(dá)明顯低于同時段DAI模型組;治療2組內(nèi)NgR陽性蛋白的表達(dá)較治療1組更低。假手術(shù)組與對照組相比無明顯差異。
3.DAI模型組的大鼠腦內(nèi)GAP-43蛋白的表達(dá)水平在頭部損傷后逐漸升高,以傷后第7天最明顯,隨后有所下降,至第14天仍高于正常表達(dá)水平。DAI模型組各時間點的GAP-43陽性蛋白表達(dá)均高于同時段正常對照組及假手術(shù)組;治療組大鼠腦內(nèi)GAP-43陽性蛋白的表達(dá)明
5、顯高于同時段DAI模型組;治療2組內(nèi)GAP-43陽性蛋白的表達(dá)較治療1組增高不明顯。假手術(shù)組與對照組相比無明顯差異。
結(jié)論:
1.大鼠腦彌漫性軸索損傷后,腦組織中NgR蛋白抑制神經(jīng)再生作用逐漸增強,GAP-43蛋白促進(jìn)神經(jīng)再生作用逐漸減弱。
2.NEP1-40可能通過降低NgR蛋白的表達(dá)和升高GAP-43蛋白的表達(dá),減輕腦損傷,促進(jìn)神經(jīng)軸索損傷后的再生。增加NEP1-40的給藥量可能在一定程度上
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