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文檔簡介
1、目的:本課題以傳統(tǒng)中醫(yī)學理論為基礎,通過觀察補腎化痰方對PCOS模型大鼠激素水平和卵巢組織形態(tài)的影響。揭示補腎化痰方降低大鼠促黃體生成素和雄激素水平,并改善大鼠卵巢組織形態(tài)的作用機理,為補腎化痰方治療 PCOS提供有效性科學依據。
方法:該課題選用95只同種系雌性 SPF清潔級21日齡大鼠,隨機選擇25只大鼠作為正常對照組,每日頸背部皮下注射0.2ml注射油劑,連續(xù)20d;其余70只大鼠作為病理模型組,每日頸背部皮下注射脫氫表
2、雄酮(DHEA)6mg/100g體重+0.2ml注射油劑,連續(xù)20d。造模結束后,先行大鼠動情周期測定及 OGTT實驗,再從正常組和模型組中分別隨機選取10只大鼠進行模型評估,選擇造模成功大鼠進入下一步實驗。有造模成功大鼠60只和正常組大鼠15只,將模型組大鼠60只隨機分為模型對照組、二甲雙胍組、中藥低劑量組、中藥高劑量組;每組各15只大鼠,正常組15只大鼠作為正常對照組。對各組大鼠連續(xù)灌胃4周后,觀察其陰道涂片結果,對各組實驗大鼠動情
3、間期禁食不禁水12小時處理后稱重、水合氯醛(10%)麻醉、腹主動脈取血、分離血清。對各組大鼠行斷頸處死,卵巢組織用4%多聚甲醛固定,分離血清并測定激素水平,光鏡下觀察卵巢組織形態(tài)學的變化。
結果:①實驗過程中實驗動物一般狀態(tài)的變化:模型組大鼠于頸背部皮下注射脫氫表雄酮后出現活動量減少、飲食量增加、飲水量增加、尿量增加,體重增加不明顯。以上變化隨灌胃給藥天數的增加而加劇,正常組大鼠體重逐漸增長、精神體征、活動反應如常。灌胃后,部
4、分中藥組大鼠體重下降,飲食、飲水較前減少。②本實驗中大鼠血清水平的影響:模型組的大鼠血清促黃體生成素(LH)和雄激素(T)水平均高于正常組,差別有統(tǒng)計學意義;與模型組比較,二甲雙胍組、中藥高劑量組、低劑量治療組血清 LH和T水平均明顯降低,差別有統(tǒng)計學意義;與二甲雙胍組比較,高劑量中藥組和低劑量中藥治療組血清LH和T水平均有下降,差別有統(tǒng)計學意義;中藥高劑量組與低劑量組血清 LH水平未見差別,結果無統(tǒng)計學意義;中藥高劑量組大鼠血清 T水
5、平明顯高于中藥低劑量組,差別有統(tǒng)計學意義。③對實驗大鼠卵巢組織形態(tài)學的影響:正常組卵巢組織:其可見各級卵泡,如初級卵母細胞、次級卵母細胞,生長卵泡細胞等,卵母細胞有放射冠,細胞結構排列緊密??梢姅祩€顆粒細胞,黃體數有一定數目。模型組大鼠卵巢組織:其可見多個囊泡,其囊泡即是空卵泡。正常形態(tài)的各級細胞少見,甚至沒有。見多個閉鎖細胞,卵母細胞放射冠消失,顆粒細胞較少,細胞排列疏松,黃體數目較少。二甲雙胍組大鼠卵巢組織:其可見極少數囊泡細胞,各
6、級卵泡細胞均在視野中可見且數量增多,可見到初級卵母細胞、次級卵母細胞、生長卵泡、成熟卵泡,即其成熟卵泡的卵泡膜也充分發(fā)育,內層細胞增大。卵母細胞可見放射冠、透明帶。且看到顆粒細胞增多,細胞排列緊密;黃體數目增多。中藥高劑量組大鼠卵巢組織:其可見少數囊泡細胞,視野中可見到少數初級卵母細胞、次級卵母細胞、生長卵泡以及成熟卵泡,顆粒細胞數目較模型組增多,可見一定數目黃體。中藥低劑量組大鼠卵巢組織:其可見囊泡細胞數目減少,黃體數目稍有增加??梢?/p>
7、少數生長卵泡細胞,以及少數閉鎖細胞。各組大鼠鏡下各級卵泡數目以及黃體數目比較:模型組大鼠的各級卵泡數及黃體數均低于正常組,差別有統(tǒng)計學意義。與模型組大鼠相比,二甲雙胍組、高劑量治療組、低劑量治療組大鼠的各級卵泡數及黃體數均較多,差別有統(tǒng)計學意義。與二甲雙胍組比較,高劑量治療組、低劑量治療組大鼠的各級卵泡數及黃體數數目有變化,差別有統(tǒng)計學意義。中藥高劑量組與低劑量組大鼠的各級卵泡數及黃體數目間統(tǒng)計學數據無差異,無統(tǒng)計學意義,統(tǒng)計結果雖然沒
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