氟伐他汀對抗磷脂綜合征患者血清誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9的影響.pdf

1、目的：1、探討不同濃度抗磷脂綜合征(APS)患者血清對人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9的誘導(dǎo)作用。2、探討不同濃度氟伐他汀對抗磷脂綜合征患者血清誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9的影響。
　　 材料與方法：
　　 1、細(xì)胞培養(yǎng)和分組體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)，待細(xì)胞生長到融合狀態(tài)，將細(xì)胞隨機(jī)分五組。分別用RPMI1640培養(yǎng)液、不同濃度健康人血清(25％、50％、100％)、不同濃度APS患者血清(25％、50％、100

2、％)、不同濃度APS患者血清+不同濃度的氟伐他汀(2.5、5和10μmol/L)、不同濃度APS患者血清+不同濃度的氟伐他汀(2.5、5和10μmol/L)+甲羥戊酸(0.2mmol/L)處理。不同濃度氟伐他汀于甲羥戊酸作用1h后加入，APS患者血清及RPMI1640培養(yǎng)基于氟伐他汀作用1h后加入，分別于12h、24h、48h后收集細(xì)胞。
　　 2、倒置相差顯微鏡觀察HUVEC的分布及形態(tài)。
　　 3、雙抗體夾心酶聯(lián)免疫

3、吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中MMP-9濃度。
　　 4、RT-PCR檢測MMP-9mRNA的表達(dá)水平。
　　 5、Western-blot印跡法檢測核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：一、APS患者血清對人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9的影響。
　　 1、APS患者血清作用于HUVEC后，與空白對照組及正常血清組相比，細(xì)胞培養(yǎng)液中APSMMP-9濃度總體呈逐漸升高趨勢，隨

4、APS患者血清濃度升高而升高(P＜0.05)，并于作用24h時達(dá)高峰。
　　 2、APS患者血清作用于HUVEC后，與空白對照組及正常血清組相比，NF-κBp65表達(dá)明顯增加(P＜0.05)。
　　 二、氟伐他汀對APS患者血清誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9的影響。
　　 1、與對照組相比，氟伐他汀對APS患者血清誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9及NF-κBp65表達(dá)增加有劑量依賴性抑制作用(P＜0.05)。

5、>　　 2、氟伐他汀對APS患者血清誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9及NF-κBp65表達(dá)增加的抑制作用可被甲羥戊酸阻斷(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1、APS患者血清可誘導(dǎo)人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9及NF-κBp65的表達(dá)增加，為DVT合并APS的發(fā)病機(jī)制、臨床活動性判斷及疾病轉(zhuǎn)歸提供有利線索。
　　 2、氟伐他汀可抑制APS患者血清誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9表達(dá)增加，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，抑制血栓形成。