乙醇與急性心肌梗死后大鼠冠脈側(cè)枝循環(huán)的關(guān)系及干預(yù)研究.pdf

1、背景及目的
　　心血管疾病是當(dāng)前世界重要的死亡原因之一，家族史、年齡、高血壓、高膽固醇血癥、糖尿病、肥胖、飲酒等都是冠心病的危險(xiǎn)因素。飲酒作為冠心病可以改變的危險(xiǎn)因素之一，眾多來自于大型隊(duì)列研究及薈萃分析的流行病學(xué)研究表明，適量飲酒可以降低冠心病的風(fēng)險(xiǎn)，與其發(fā)病率、死亡率的關(guān)系呈“U”或“J”字形曲線1-3]，而大量飲酒會(huì)導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈的鈣化程度明顯升高[4]，使冠心病的發(fā)病率、死亡率明顯增加[5]。另外來自許多體外的實(shí)驗(yàn)研究顯示少

2、量飲酒可以明顯提高內(nèi)皮血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)，從而促進(jìn)血管的新生[6]，臨床研究也發(fā)現(xiàn)長期少量飲酒的冠心病的患者具有豐富的冠脈側(cè)枝循環(huán)[7]。然而長期給予不同乙醇量對急性心肌梗死后缺血心肌內(nèi)血管新生的影響及其作用機(jī)制如何？目前尚缺乏這方面的研究。
　　羥甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑（他?。┠壳耙咽枪谛牟∫患?jí)及二級(jí)預(yù)防的基石，臨床證據(jù)已經(jīng)充分表明，長期給予他汀類藥物治療能夠顯著降低心血管事件發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，長期應(yīng)用他汀的患者

3、將明顯獲益，目前認(rèn)為其機(jī)制主要通過降脂、抗炎、抗氧化、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞等作用發(fā)揮心血管保護(hù)功能。最新的研究還發(fā)現(xiàn)，他汀類藥物可以抑制心室重構(gòu)，并能夠促進(jìn)缺血心肌內(nèi)血管新生等心臟保護(hù)作用[8-10]。因此我們提出假設(shè)，若長期大量飲酒對心肌梗死后缺血心肌內(nèi)冠脈側(cè)枝循環(huán)有抑制作用，那么長期預(yù)防性應(yīng)用他汀類藥物是否能夠逆轉(zhuǎn)大量飲酒對血管新生的這種抑制作用？目前缺乏這方面的報(bào)道。
　　因此本實(shí)驗(yàn)首先利用急性心肌梗死動(dòng)物模型觀察長期不同量乙醇

4、攝入對缺血心肌內(nèi)血管新生及其血管生長調(diào)節(jié)因子（包括VEGF和內(nèi)皮抑素）表達(dá)水平的影響，然而根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果來驗(yàn)證提出的假設(shè)是否成立，若假設(shè)成立，則應(yīng)用他汀類藥物看是否可以逆轉(zhuǎn)大量飲酒對心肌血管新生的抑制作用，旨在為新的冠心病干預(yù)方式提供更多的理論支持。
　　第一部分乙醇對急性心肌梗死后大鼠冠脈側(cè)枝循環(huán)的影響
　　方法
　　選取225～275g雄性SD大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后;隨機(jī)分成4組:假手術(shù)組（不做任何干預(yù)處理），空白對

5、照組（蒸餾水，5g·kg-1·d-1），乙醇干預(yù)組:小劑量（50％食用乙醇，0.5g·kg-1·d-1），大劑量（50％食用乙醇，5g·kg-1·d-1）。連續(xù)喂養(yǎng)4周后制作成心肌梗死模型，假手術(shù)組在相應(yīng)部位空穿一次;于術(shù)后第3天處死所有組別內(nèi)的大鼠，留取梗死邊緣區(qū)心肌組織，采用免疫組織化學(xué)SP法檢測梗死邊緣區(qū)心肌內(nèi)CD34微血管密度(MVD)，應(yīng)用ELISA法測定梗死邊緣區(qū)心肌組織勻漿液中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及內(nèi)皮抑素的表達(dá)水

6、平。通過方差分析研究各組間梗死邊緣區(qū)MVD及VEGF、內(nèi)皮抑素表達(dá)水平有無差異。
　　結(jié)果顯示
　　空白對照組與假手術(shù)組相比，MVD明顯增加[(88.7±3.4)N/mm2比(70.6±6.3)N/mm2，P＜0.05)];VEGF、內(nèi)皮抑素水平也明顯升高[(318.7±18.6)pg/ml比(217.4±26.5)pg/ml;(306.9±53.9)ng/ml比(194.1±11.3)ng/ml，P＜0.05）];與空白對

7、照組相比，小劑量乙醇組MVD明顯增加[(128.6±12.9)N/mm2比(88.7±3.4)N/mm2，P＜0.05）]，VEGF表達(dá)明顯升高[(438.2±46.2)pg/ml比(318.7±18.6)pg/ml，P＜0.05)]，而內(nèi)皮抑素濃度明顯降低[(230.7±48.1)ng/ml比(306.9±53.9)ng/ml，P＜0.05）]，而大劑量乙醇組與空白對照組相比，MVD明顯減少[(55.4±8.6)N/mm2比(88.7

8、±3.4)N/mm2，P＜0.05)]，VEGF水平雖無明顯差異，但內(nèi)皮抑素表達(dá)水平明顯升高[(437.5±66.7)ng/ml比(306.9±53.9)ng/ml，P＜0.05)]。
　　第二部分瑞舒伐他汀改善大量乙醇對急性心肌梗死后大鼠血管新生的影響
　　方法
　　選取225～275g雄性SD大鼠，設(shè)立瑞舒伐他汀預(yù)處理組:瑞舒伐他汀[(20mg·kg-1·d-1)+大劑量乙醇組(50％食用乙醇，5g·kg-1·d-

9、1)]，與第一部分的空白對照組（蒸餾水5g·kg-1·d-1）及大劑量乙醇組（50％乙醇，5g·kg-1·d-1）相比較，所有組別內(nèi)大鼠連續(xù)喂養(yǎng)4周后，制作心肌梗死動(dòng)物模型，術(shù)后第3天處死所有組別大鼠，留取梗死邊緣區(qū)存活心肌組織，采用免疫組織化學(xué)SP法檢測梗死邊緣區(qū)心肌內(nèi)CD34微血管密度(MVD)，應(yīng)用ELISA法測定各組梗死邊緣區(qū)心肌組織勻漿液中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及內(nèi)皮抑素水平。
　　結(jié)果顯示
　　大劑量乙醇組

10、與空白對照組相比的結(jié)果同第一部分，與大劑量乙醇組相比，瑞舒伐他汀預(yù)處理組MVD明顯增加[(73.1±3.2)N/mm2比(55.4±8.6)N/mm2，P＜0.05)];VEGF表達(dá)略有升高，內(nèi)皮抑素有降低趨勢，但與大量乙醇組相比均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論
　　1.長期飲酒可以影響急性心肌梗死后缺血心肌內(nèi)VEGF、內(nèi)皮抑素的表達(dá)。
　　2.少量飲酒通過促進(jìn)VEGF，并抑制內(nèi)皮抑素的表達(dá)促進(jìn)冠脈側(cè)枝循環(huán)血管的新生。<