胰島素干預(yù)對體外高糖環(huán)境大鼠肝細(xì)胞白蛋白mRNA表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：觀察在高濃度葡萄糖（11.1mmol/L）環(huán)境下，不同的胰島素劑量對大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與Kupffer細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)體系對大鼠肝細(xì)胞白蛋白基因表達(dá)的影響，并對相關(guān)機(jī)制進(jìn)行探討。方法：利用原位二步Ⅳ型膠原灌注法，Percoll液密度梯度離心法分離Wistar大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與Kupffer細(xì)胞；體外將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與Kupffer細(xì)胞按6:1比例共同培養(yǎng)，用11.1mmol/L葡萄糖處理該聯(lián)合培養(yǎng)體系，然后再用不同劑量的胰島素[胰島素（IU）：

2、葡萄糖（g）=2:1，G1組；1:1，G2組；1:2，G3組；1:4，G4組]處理細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)體系，分別于處理后的4h、24h留取細(xì)胞培養(yǎng)上清液，檢測白蛋白濃度及IL-1、IL-6、TNF-α含量，提取肝細(xì)胞RNA，使用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈法（RT-PCR）檢測白蛋白mRNA表達(dá)。結(jié)果：高濃度葡萄糖（11.1mmol/L）環(huán)境下，采用不同劑量胰島素進(jìn)行處理后的4h，24h細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)體系的細(xì)胞培養(yǎng)上清液IL-1、IL-6、TNF-α水平隨胰島