手十二井穴刺絡(luò)放血對(duì)抑郁大鼠行為學(xué)及海馬GFAP、BDNF的影響.pdf

1、背景： 抑郁癥是一種常見(jiàn)的情緒障礙性疾病，表現(xiàn)為情緒低落、軀體不適和睡眠障礙等持久的抑郁狀態(tài)，甚至有生不如死感，明顯影響日常生活和社會(huì)功能，是全球性的主要精神衛(wèi)生疾?。壳叭澜缂s有3.4億人受其影響。我國(guó)根據(jù)其高患病率、高復(fù)發(fā)率，高自殺率．同時(shí)又是低識(shí)別率，低診治率的特點(diǎn)，將抑郁癥列為重點(diǎn)疾病，將防治目標(biāo)定為：提高知曉率，提高治愈率。毫無(wú)疑問(wèn)，對(duì)抑郁癥診治的探討已成為擺在我國(guó)醫(yī)學(xué)工作者面前的一個(gè)重要課題。而針灸治療抑郁癥已經(jīng)取

2、得了肯定的療效，其多層次、多途徑、多靶點(diǎn)的治療作用，不但保護(hù)了腦組織，迅速緩解情緒低落的主癥，還可以通過(guò)整體調(diào)節(jié)作用改善運(yùn)動(dòng)、消化、飲食、睡眠等多系統(tǒng)癥狀，至今未見(jiàn)有關(guān)副作用的報(bào)道，且價(jià)格便宜，深受廣大患者的歡迎。 目的： 本研究旨在觀察手十二井穴刺絡(luò)放血療法對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠行為學(xué)指標(biāo)及腦內(nèi)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)的影響，以驗(yàn)證此法治療抑郁癥的有效性，明確針灸治療抑郁癥的部分機(jī)

3、制，從而探索新的有效治療途徑。 方法： 24只SD大鼠隨機(jī)分為正常組(A組)、模型組(B組)、氟西汀組(C組)、刺絡(luò)放血組(D組)，每組6只。用慢性不可預(yù)見(jiàn)性輕度刺激結(jié)合孤養(yǎng)的方法造模，給予B、C、D組21天不同的應(yīng)激刺激。最后一次慢性輕度應(yīng)激24h后開(kāi)始：B組，不繼續(xù)給予刺激也不予任何治療。C組，每天給予氟西汀10mg/kg劑量溶于1.0ml生理鹽水中灌胃。治療持續(xù)21 天。D組，選用大鼠雙側(cè)前肢趾端的十二井穴刺絡(luò)放血

4、，隔日一次，共11次，出血量為每穴1滴。整個(gè)造模的過(guò)程中第1、7、14、21天及治療結(jié)束時(shí)均對(duì)每只動(dòng)物進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，記錄動(dòng)物運(yùn)動(dòng)情況。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每周對(duì)每只動(dòng)物進(jìn)行一次液體消耗實(shí)驗(yàn)。整體實(shí)驗(yàn)治療結(jié)束后第2天，所有大鼠經(jīng)腹腔麻醉，心臟4％多聚甲醛磷酸緩沖溶液灌注內(nèi)固定后，斷頭取腦。用免疫組織化學(xué)染色的方法觀察大鼠腦內(nèi)海馬區(qū)域GFAP、BDNF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量的變化。 結(jié)果： 1、慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性的應(yīng)激14天，B組、D組大鼠

5、的體重與攝食量都顯著低于A組(P=0.001)，這種變化持續(xù)于隨后的整個(gè)造模期。治療結(jié)束后，B組仍與A組有顯著差異，D組與A組沒(méi)有差異，而C組與A組之間始終沒(méi)有差異(P>0.05)。 2、經(jīng)單因素方差分析的結(jié)果表明，B、C、D三組在造模過(guò)程中，在水平運(yùn)動(dòng)得分、垂直運(yùn)動(dòng)得分、中央格停留時(shí)間及清潔動(dòng)作次數(shù)四項(xiàng)指標(biāo)上，都或早或晚地與A組產(chǎn)生差異，并在造模完成時(shí)，各組水平運(yùn)動(dòng)得分和垂直運(yùn)動(dòng)得分仍保持顯著性差異，P<0.05。同時(shí)，C組與

6、D組之間沒(méi)有差異，P>0.05。 3、治療結(jié)束時(shí)，治療組(C組、D組)各項(xiàng)指標(biāo)與正常對(duì)照組(A組)沒(méi)有差異，P>0.05，而抑郁模型組(B組)仍保持顯著差異，P<0.05。同時(shí)，C組與D組之間沒(méi)有差異，P>0.05。 4、統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，各組大鼠在應(yīng)激前對(duì)糖水獎(jiǎng)勵(lì)的反應(yīng)沒(méi)有差異，但在應(yīng)激結(jié)束時(shí)，B、C、D組大鼠都明顯表現(xiàn)出與A組正常大鼠的不同，出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05)。 5、B組大鼠腦內(nèi)GFAP、BDNF陽(yáng)性

7、細(xì)胞數(shù)目與A組有顯著性差異(P<0.01)，而刺絡(luò)放血組與正常組及氟西汀組之間沒(méi)有差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1、本實(shí)驗(yàn)將慢性輕度應(yīng)激和孤養(yǎng)兩種經(jīng)典模型結(jié)合，利用長(zhǎng)期不可預(yù)見(jiàn)性的輕度刺激，成功建立了較為理想的抑郁動(dòng)物模型，為進(jìn)一步研究抑郁發(fā)病的機(jī)理提供了實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。 2、手十二井穴刺絡(luò)放血治療方法能夠干預(yù)/對(duì)抗抑郁模型大鼠行為學(xué)的改變，驗(yàn)證了其治療抑郁癥的有效性。 3、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)和腦