電針對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠行為學(xué)和海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:通過電針對(duì)抑郁模型大鼠的干預(yù),觀察電針對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)、海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡以及電針對(duì)抑郁模型大鼠Bcl-2和Bax基因和蛋白的影響,探討電針抗抑郁癥的機(jī)理。
　　方法:①采用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)的方法建立SD大鼠的抑郁模型;②通過對(duì)體重的測量以及開野實(shí)驗(yàn)(Open-Field)和糖水消耗實(shí)驗(yàn),觀察電針對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)的影響;③通過末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT酶)介導(dǎo)的脫氧尿苷三磷酸(dUTP)缺口末端標(biāo)記

2、(TUNEL)技術(shù),觀察電針對(duì)抑郁模型大鼠海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡的影響;④通過免疫組織化學(xué)法觀察電針對(duì)抑郁模型大鼠海馬CA1區(qū)凋亡相關(guān)因子Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá);⑤通過逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)方法觀察電針對(duì)抑郁模型大鼠海馬CA1區(qū)凋亡相關(guān)因子Bcl-2和BaxmRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:①模型組大鼠經(jīng)過35天的慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)處理,與正常組比較體重明顯減輕(P<0.01),水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)和正常組比較明

3、顯減少(P<0.01),糖水的消耗量較正常組也明顯減少(P<0.01)。電針組和氟西汀組大鼠的體重較模型組大鼠體重有所升高(P<0.05),較正常組大鼠體重增長相對(duì)緩慢,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);電針組和氟西汀組大鼠糖水消耗量較模型組增加明顯(P<0.05),較正常組有所降低(P>0.05),兩組大鼠的水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)較模型組均有所提高(P<0.05),與正常組大鼠運(yùn)動(dòng)次數(shù)比較有所降低,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);電針組和氟

4、西汀組大鼠的體重、糖水消耗量、水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)都沒有明顯的差異(P>0.05)。②在實(shí)驗(yàn)各組海馬CA1區(qū)均可以觀察到細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒的凋亡細(xì)胞。模型組海馬CA1區(qū)凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)較正常組有明顯的增加,差異有顯著性(P<0.01),與電針組和氟西汀組CA1區(qū)凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);電針組和氟西汀組海馬CA1區(qū)凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)與正常組比較有所增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);電針組海馬CA1區(qū)凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)與氟西汀組比較

5、無顯著差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。③實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型組大鼠海馬CA1區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)光密度值明顯低于正常組,差異具顯著性(P<0.05),Bax蛋白表達(dá)明顯高于正常組,差異具顯著性(P<0.05);模型組與電針組和氟西汀組比較,Bcl-2蛋白表達(dá)光密度值低于電針組和氟西汀組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);模型組大鼠Bax蛋白表達(dá)光密度值高于電針組和氟西汀組,差異具顯著性(P<0.05);電針組和氟西汀組Bcl-2蛋白表達(dá)

6、光密度值較正常組比較有所降低,但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),電針組和氟西汀組Bax蛋白表達(dá)光密度值較正常組比較增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);電針組和氟西汀組大鼠海馬Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)對(duì)比差異不大,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。④實(shí)驗(yàn)所提取的RNA,經(jīng)分光光度計(jì)檢測,其0D260/0D280的值介于1.8～2.0之間,證明所提取的RNA純度較高,降解較少。模型組與正常組Bcl-2mRNA相對(duì)表達(dá)量比較有明顯的降低,差

7、別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),BaxmRNA相對(duì)表達(dá)量較正常組BaxmRNA相對(duì)表達(dá)量比較有明顯的升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);模型組與電針組和氟西汀組Bcl-2mRNA相對(duì)表達(dá)量比較有所降低,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),模型組與電針組和氟西汀組BaxmRNA相對(duì)表達(dá)量比較有所提高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);電針組和氟西汀組與正常組Bcl-2mRNA相對(duì)表達(dá)量比較差異不大,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),Bax

8、mRNA表達(dá)較正常組有所升高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);電針組和氟西汀組Bcl-2mRNA、BaxmRNA相對(duì)表達(dá)量比較差異不大,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:①慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)可以降低大鼠的體重,減少大鼠的糖水消耗量,減少大鼠的水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng),電針可以逆轉(zhuǎn)慢性輕度不可預(yù)見性輕度刺激所造成的抑郁癥狀。②抑郁模型大鼠海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡增加,電針治療可以降低海馬CA1區(qū)的細(xì)胞凋亡。③抑郁模型大