早期嗅覺剝奪對SD大鼠海馬突觸外GABAA受體及行為學(xué)影響的研究.pdf

1、目的：探討早期嗅覺剝奪對SD大鼠海馬突觸外γ-氨基丁酸 A(GABAA)受體表達(dá)及行為學(xué)的影響。
　　方法：將3日齡與8日齡SD大鼠的乳鼠各36只分別隨機(jī)分為空白對照組、實(shí)驗(yàn)組、假手術(shù)組，每組再分為2個(gè)亞組共6組實(shí)驗(yàn)鼠。其中通過三氯甲烷滴注法分別對3天實(shí)驗(yàn)組和8天實(shí)驗(yàn)組乳鼠的嗅粘膜進(jìn)行破壞；3天和8天假手術(shù)組則是用生理鹽水替代；空白對照組不給予任何處理。各組在3周齡時(shí)進(jìn)行水迷宮的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，4周齡時(shí)斷頭取腦組織進(jìn)行尼氏染色觀察；使

2、用免疫組織化學(xué)以及實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增（q-PCR）對海馬中突觸外GABAA受體δ亞基與α5亞基相關(guān)蛋白及mRNA的表達(dá)進(jìn)行相對定量與定量分析。
　　結(jié)果：1、行為學(xué)改變：（1）逃避潛伏期：結(jié)果顯示3天實(shí)驗(yàn)組逃避潛伏期在實(shí)驗(yàn)第二日，第三日和第四日較3天假手術(shù)組與空白對照組均有明顯的升高，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；3天假手術(shù)組與空白對照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；而8天實(shí)驗(yàn)組逃避潛伏期在4日實(shí)驗(yàn)中與8天假手術(shù)組和空白

3、對照組兩兩比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。（2）目標(biāo)象限所處時(shí)間：結(jié)果顯示3天實(shí)驗(yàn)組目標(biāo)象限所處時(shí)間較3天假手術(shù)組與空白對照組均有明顯降低，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；3天假手術(shù)組與空白對照組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；而8天實(shí)驗(yàn)組、8天假手術(shù)組和空白對照組間兩兩比較，結(jié)果均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。2、形態(tài)學(xué)改變：（1）尼氏染色：3天實(shí)驗(yàn)組海馬齒狀回神經(jīng)元細(xì)胞排列不規(guī)整，細(xì)胞間距離增大，尼氏體減少，齒狀回顆粒細(xì)胞排

4、列松散紊亂。3天組內(nèi)比較與8天組內(nèi)比較，海馬齒狀回與C A3區(qū)神經(jīng)元數(shù)目均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。（2）免疫組化：3天實(shí)驗(yàn)組中海馬齒狀回突觸外GABAA受體δ亞基與C A3區(qū)的α5亞基相關(guān)蛋白表達(dá)均下降，與3天假手術(shù)組和空白對照組的比較中均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；8天實(shí)驗(yàn)組、8天假手術(shù)組和空白對照組之間進(jìn)行兩兩比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；3、分子生物學(xué)改變：實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增（q-PCR）結(jié)果顯示，3天實(shí)驗(yàn)

5、組海馬腦區(qū)中的突觸外GABAA受體δ亞基與α5亞基mRNA表達(dá)均下降，與3天假手術(shù)組和空白對照組比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；8天實(shí)驗(yàn)組、8天假手術(shù)組和空白對照組之間進(jìn)行兩兩比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：1、早期嗅覺剝奪組大鼠海馬齒狀回神經(jīng)元較其他各組排列不整齊，細(xì)胞間距離增大，尼氏體減少，齒狀回顆粒細(xì)胞排列松散紊亂；2、突觸外GABAA受體δ亞基與α5亞基mRNA以及蛋白表達(dá)顯著減少；3、行為學(xué)上