國產(chǎn)L-聚乳酸的生物相容性與體內(nèi)降解的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過基礎(chǔ)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)和動物體內(nèi)降解實(shí)驗(yàn),全面評價國產(chǎn)L-聚乳酸的生物相容性和體內(nèi)降解機(jī)制.方法:1.基礎(chǔ)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)部分:①使用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)(MTT法):檢測PLA材料浸提液對L929小鼠成纖維細(xì)胞的毒性.②溶血實(shí)驗(yàn):檢測PLA材料浸提液對家兔紅細(xì)胞的溶血毒性.2.動物實(shí)驗(yàn)部分:①急性毒性試驗(yàn):采用不同濃度組PLA標(biāo)準(zhǔn)浸提液小鼠灌胃法,觀察PLA材料急性毒性作用;②致熱源試驗(yàn):PLA標(biāo)準(zhǔn)浸提液家兔腹腔注射,觀測測家兔體溫變化(肛溫

2、);③致敏原試驗(yàn):PLA標(biāo)準(zhǔn)浸提液皮內(nèi)注射,觀察材料致敏性.④動物體內(nèi)植入試驗(yàn).取24個PLA棒材,分為6組,每組實(shí)驗(yàn)動物將L-聚乳酸棒材植入家兔脊柱一側(cè)肌袋內(nèi),對側(cè)植入不銹鋼棒材作為對照組.實(shí)驗(yàn)動物共分6組,每組4只家兔,同一時期植入,植入后分別于1,2,4,8,16,20周將受試材料取出,同時取出材料周圍所形成包膜組織.包膜組織觀察指標(biāo)有:a.)包膜電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),包膜組成;b.)包膜常規(guī)HE染色病理組織切片下觀察包膜厚度,細(xì)胞

3、組成,細(xì)胞形態(tài),包膜主要組成成分.受試PLA棒材觀察指標(biāo)有:a.)PLA棒材外形,透明度變化;b.)PLA棒材在不同時期材料質(zhì)量變化;c.)PLA棒材在不同時期分子量變化;d.)PLA棒材生物力學(xué)變化.結(jié)果:1.基礎(chǔ)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果:①R小鼠成纖維細(xì)胞系(L929細(xì)胞系)經(jīng)L-聚乳酸標(biāo)準(zhǔn)浸提液,處理后,分別于1,2,3天后觀察細(xì)胞形態(tài),計數(shù)細(xì)胞增殖率,采用MTT法.發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)良好,增值旺盛,計算A值,RGR值,評價PLA材料毒性級別0

4、-1級.②溶血試驗(yàn):材料溶血率為2.4％.符合溶血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)要求.2.動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果:①急性毒性試驗(yàn):PLA材料無急性毒性作用;②致熱源試驗(yàn):PLA材料無致熱原性;③致敏原試驗(yàn):PLA材料無致敏原性;④動物體內(nèi)植入試驗(yàn):a.PLA周圍包膜在8周植入期以前包膜厚度厚于對照組不銹鋼棒組,包膜內(nèi)炎癥反應(yīng)強(qiáng)于不銹鋼棒對照組.包膜內(nèi)細(xì)胞主要以淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞為主.8周至20周包膜厚度相似于不銹鋼對照組.炎癥反應(yīng)逐漸減輕,細(xì)胞成分以淋巴細(xì)胞為主.包

5、膜內(nèi)可見較多膠原纖維增生.未見明顯巨嗜細(xì)胞聚集現(xiàn)象,未見明顯血管增殖現(xiàn)象;b.PLA材料變化:PLA受試材料質(zhì)量逐漸下降,材料形狀逐漸變?yōu)榻孛鏋闄E圓形不規(guī)則棒狀,直至20周左右降解為果凍樣細(xì)顆粒物,材料透明度持續(xù)降低,變?yōu)槿榘咨煌该鳂?材料分子量在早期(2周左右)下降較快,隨后降低趨于平緩.材料生物力學(xué)降低較快,8周左右下降40％左右.結(jié)論:①無菌性炎癥反應(yīng)是國產(chǎn)PLA的主要組織反應(yīng),②同不銹鋼內(nèi)固定材料相比,PLA材料生物相容性良好