基于固定化漆酶催化的光纖腎上腺素傳感器研究.pdf

1、腎上腺素具有調節(jié)肝臟、骨骼肌及脂肪組織的分解代謝、影響人體肌肉中葡萄糖及蛋白質代謝的作用，同時能夠促使肝糖原分解，加強機體應付意外情況的能力。由于腎上腺素與人們的健康密切相關，因此可以通過對人體內腎上腺素的檢測對多種疾病進行早期診斷與預測。正常情況下血漿，尿液中的腎上腺素的濃度很低，同時由于樣品前期處理復雜和受檢測儀器靈敏度的限制，現(xiàn)階段對腎上腺素的檢測往往難以滿足臨床診斷和基礎研究的需要，因此非常迫切需要開發(fā)新型的腎上腺素傳感器。

2、 有機-無機納米復合材料是一個新興的多學科交叉的研究領域，由于其結構特殊、性能優(yōu)異而展現(xiàn)出誘人的應用前景，近期已成為材料學中的研究熱點。在本文中我們制備了有機-無機納米復合粒子固定化漆酶，用該固定化酶構建了基于漆酶催化的熒光猝滅型光纖腎上腺素生物傳感器，并研究了其傳感特性。 本學位論文在以下幾個方面進行了系統(tǒng)的研究： (1)利用原位復合法制備了ZnTAPc-Fe<,3>O<,4>納米復合粒子。對所得的粒子利用紅外、振

3、動樣品磁強計、掃描電鏡等進行表征。所得到的納米復合粒子的平均粒徑可達到15nm左右，接近超順磁性，分散性好，有良好的生物相容性，而且表面有大量活性官能團(-NH<,2>)，是一種優(yōu)良的載體材料。 (2)以ZnTAPc-Fe<,3>O<,4>納米復合粒子為載體通過交聯(lián)法固定了血紅密孔菌真菌漆酶，研究了戊二醛的濃度、牛血清白蛋白的濃度、反應過程中的pH值、漆酶的用量等因素對固定化漆酶活性的影響，以ABTS為底物固定化漆酶的最佳使用溫

4、度為0℃，最佳使用pH值為3，Km值為20.1μM，比游離酶略大(12.6μM)。固定化漆酶具有較好的熱穩(wěn)定性、貯存穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性。 (3)設計和構建了基于熒光猝滅效應的光纖腎上腺素生物傳感器測試系統(tǒng)，以固載在ZnTAPc-Fe<,3>O<,4>納米復合粒子上的固定化漆酶為催化劑，ABTS為介體，研究漆酶-介體體系滯后相移曲線的變化。在光纖腎上腺素生物傳感器中固定化酶的活力、ABTS的濃度都對腎上腺素的檢測范圍有影響，選擇適