草豆蔻等15種常用中藥材高效薄層色譜指紋圖譜研究.pdf

1、中藥指紋圖譜能夠體現中藥成分的復雜性和相關性，是世界公認的一種能全面、綜合地評價和控制中藥材質量的有效手段。構建中藥材的指紋圖譜，使每種藥材都擁有其獨特的標準圖譜，能夠直觀、系統地評價藥材質量，是解決中藥研究和生產過程中質量控制問題的有效手段之一。
　　薄層色譜法（Thin Layer Chromatography，簡稱TLC）是色譜法中最常見的一種，也是構建中藥指紋圖譜的基本技術之一，它能同時分離多個樣品，且所用流動相選擇范圍較

2、廣，可適用于各種性質的化合物，通過分析原始彩色圖譜，經圖像數據處理，可轉化為定性、定量的直觀數據，為科學工作者提供多層面的信息。但傳統的TLC法存在薄層板硅膠顆粒較粗、點樣方式手動化等缺陷，從而導致圖譜的重現性和分辨率均較差。
　　高效薄層色譜法(High Performance Thin Layer Chromatography，簡稱HPTLC)彌補了經典TLC法的不足，已成為現代實驗室最常用的一項薄層技術手段之一。HPTLC法

3、使用的薄層板粒徑較小(3～8μ m)，并常結合自動點樣裝置來代替?zhèn)鹘y的手工操作，從而得到分辨率更高的色譜圖，提高了分析結果的準確度和重現性。中藥材薄層色譜指紋圖譜研究的相關報道較多，建立的圖譜大多較為清晰、美觀，為中藥材的鑒別和質量評價提供了參考依據，但中藥材種類繁多，數量龐大，建立和完善中藥材的指紋圖譜需要經歷一個長期的積累過程。
　　故本課題以HPTLC法為研究手段，以草豆蔻、紅豆蔻、益智、高良姜、姜黃、山柰、八角茴香、小茴香

4、、胡椒、花椒、佩蘭、石菖蒲、辛夷、細辛以及防風15種常用中藥材的揮發(fā)油成分、草豆蔻黃酮類成分以及胡椒乙醇部位為研究對象，建立了上述15種藥材的HPTLC指紋圖譜以及不同批次藥材指紋圖譜的共有模式，并對每一批藥材與其共有模式之間進行了相似度的比較，以此來評價不同商品來源的藥材之間是否存在顯著的質量差異。
　　本課題主要研究內容概括如下:
　　1收集10個不同商品來源的草豆蔻等15種常用中藥材
　　在廣州市的不同藥店和藥材

5、市場收集到了不同商品來源的草豆蔻、紅豆蔻、益智、高良姜、姜黃、山柰、八角茴香、小茴香、胡椒、花椒、佩蘭、石菖蒲、辛夷、細辛以及防風藥材各10個不同批次，并以水蒸氣蒸餾法或石油醚超聲法提取各藥材的揮發(fā)油成分、95％甲醇超聲法提取草豆蔻藥材的黃酮類成分、超聲法提取胡椒藥材的乙醇部位，作為本課題的研究對象。
　　2考察草豆蔻等15種常用中藥材的揮發(fā)油成分或其他成分的薄層色譜條件
　　本實驗對草豆蔻等藥材的薄層色譜條件進行了較全面的

6、考察。首先，對各藥材的展開系統進行了篩選;其次，對各藥材的薄層展開溫度(4℃、25℃、40℃)以及薄層展開濕度(18％、32％、47％、65％、72％)分別進行了考察;然后對儀器的精密度、制樣方法的重復性以及供試品溶液的穩(wěn)定性進行了考察，從而最終確定了各藥材的最佳薄層色譜條件。本文建立的草豆蔻等15種常用中藥材薄層色譜條件均能得到重復性高、分離度好、清晰且豐富的薄層斑點。
　　3建立草豆蔻等15種常用中藥材的HPTLC指紋圖譜的共

7、有模式
　　將草豆蔻等15種中藥材的HPTLC圖譜導入到CHROMAP1.5色譜指紋圖譜系統解決方案軟件，獲得由數個特征峰構成的各藥材揮發(fā)油成分、草豆蔻黃酮類成分以及胡椒乙醇部位的指紋圖譜，并指認各對照品所在特征峰的位置，同時建立了10批不同商品來源各藥材指紋圖譜的共有模式。利用各藥材特有的指紋圖譜特征，可以直觀、快速地對草豆蔻等15種常用中藥材進行鑒別。此外，通過參考草豆蔻等中藥材共有模式中特征峰的峰面積或者比例，可以有效地控制

8、藥材的質量，為其質量標準的制定提供參考依據。
　　4對比和分析不同商品來源藥材的質量
　　將10批不同商品來源的草豆蔻等15種中藥材的薄層色譜指紋圖譜數據與其共有模式進行比較，計算夾角余弦相似度，通過相似度的比較來評價不同批次藥材之間的質量差異。結果表明草豆蔻、益智、高良姜、姜黃、八角茴香、小茴香、佩蘭、辛夷以及細辛9種藥材不同批次之間相似度較高，說明各藥店及藥材市場上售賣的這9種藥材質量相對穩(wěn)定;紅豆蔻、山柰、胡椒、花椒、