魚腥草指紋圖譜研究及其中黃酮類成分分離制備.pdf

1、魚腥草為三白草科植物蕺菜(HouttuyniacordataThunb.)的全草，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋及止咳化痰等功效，同時對多種細(xì)菌有抑制作用。為了開拓其應(yīng)用范圍和對魚腥草進(jìn)行較全面的質(zhì)量控制，本實(shí)驗(yàn)對其中的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行分離純化，以期為新藥開發(fā)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。同時應(yīng)用不同的儀器分析手段建立了信息互補(bǔ)的魚腥草HPLC-DAD和GC指紋圖譜，以全面地反映出魚腥草的化學(xué)組成特征。實(shí)驗(yàn)主要從以下兩方面展開:
　　 一、對黃

2、酮類化合物進(jìn)行分離純化（第二章）。實(shí)驗(yàn)采用有機(jī)溶劑萃取，硅膠柱層析，結(jié)合高效液相色譜，最后采用半制備液相色譜，對魚腥草中的黃酮類化合物進(jìn)行分離純化，最終獲得6個黃酮類物質(zhì)的單體。通過與標(biāo)準(zhǔn)品對照及LC-MS數(shù)據(jù)進(jìn)一步確定，鑒定了其中4個化合物，分別為槲皮苷、槲皮素、金絲桃苷、異槲皮苷，將色譜峰峰面積歸一化，可以得出4種物質(zhì)的純度分別為98.31％、96.11％、99.25％、89.7％。
　　 二、建立了魚腥草的HPLC-DAD

3、和GC指紋圖譜（第三章和第四章）。魚腥草廣泛種植于各個地區(qū)，不同的地區(qū)，種植環(huán)境不同。而種植環(huán)境對其中的有效成分影響較大，從而導(dǎo)致魚腥草的質(zhì)量控制難以把握。因此，本實(shí)驗(yàn)一方面利用HPLC-DAD指紋圖譜技術(shù)分析了全國12個主要產(chǎn)區(qū)的魚腥草中非揮發(fā)性化學(xué)成分（第三章）。內(nèi)容包括:提取條件和色譜分離條件的優(yōu)化、方法學(xué)考察、相似度分析和主要活性成分的含量分析。結(jié)果表明不同產(chǎn)地魚腥草非揮發(fā)性成分分布相似性較好，相似度均達(dá)到0.92以上，但主要活

4、性成分含量差別較大。同時考察了不同存儲時間對魚腥草中非揮發(fā)性成分的影響，結(jié)果表明12個月內(nèi)的魚腥草非揮發(fā)性化學(xué)成分穩(wěn)定，可以儲存。
　　 另一方面用GC指紋圖譜技術(shù)對7個產(chǎn)地的魚腥草揮發(fā)性成分進(jìn)行分析（第四章）。結(jié)合相似度評價方法和主要成分含量分析對7個產(chǎn)地的魚腥草藥材指紋圖譜進(jìn)行了較深入的研究。結(jié)果表明不同產(chǎn)地魚腥草揮發(fā)性成分分布有一定相似性，但主要活性成分含量差別較大。揮發(fā)性成分分析與非揮發(fā)性成分分析結(jié)果吻合，均說明產(chǎn)地對有