山西道地藥材黃芪中黃酮類有效成分指紋圖譜及體外代謝研究.pdf

1、蒙古黃芪(Astragalus membranaceus(Fish.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao)為豆科黃芪屬植物，性溫，味甘，有補(bǔ)氣固表，利尿托毒，斂瘡生肌，益氣補(bǔ)中之功效。主要用于食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，子宮脫垂，慢性腎炎蛋白尿，糖尿病，創(chuàng)口久不愈合。其化學(xué)成分眾多，主要有效成分為黃酮類、皂苷類及多糖類。近年來，對(duì)于黃芪的化學(xué)成分、指紋圖譜及有效成分代謝的研究日益

2、深入，本文建立了黃芪中兩種黃酮類主要成分的含量測(cè)定方法，建立了黃芪中黃酮類成分的指紋圖譜并初步研究了黃酮類成分的體外代謝。 根據(jù)黃酮類成分的紫外吸收特征，本實(shí)驗(yàn)以254 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，采用反相-高效液相色譜法(RP-HPLC)建立了芒柄花素和毛蕊異黃酮的含量測(cè)定方法，通過對(duì)方法的線性、精密度、回收率等的考察，結(jié)果表明：芒柄花素在1～40μg/mL的濃度范圍內(nèi)線性良好，日內(nèi)、日間精密度均小于2％，加樣回收率在98.0％～102.

3、0％之間，符合《中國(guó)藥典(2005版)》要求；毛蕊異黃酮在1～100μg/mL的濃度范圍內(nèi)線性良好，日內(nèi)、日間精密度均小于2％，加樣回收率在98.0％～102.0％之間，符合《中國(guó)藥典(2005版)》要求，為黃芪的有效成分含量測(cè)定提供了準(zhǔn)確、精密的方法。 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以芒柄花素含量為指標(biāo)，用正交設(shè)計(jì)法對(duì)影響超聲提取的因素如乙醇濃度、乙醇用量、提取次數(shù)和超聲時(shí)間進(jìn)行考察，優(yōu)化黃酮類成分的提取工藝，優(yōu)化的提取條件為加15倍

4、量75％乙醇，連續(xù)提取3次，每次20 min。 采用梯度洗脫模式研究了5批蒙古黃芪中黃酮類成分的指紋圖譜，定性了蒙古黃芪中毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮和芒柄花素三種主要的黃酮類成分，結(jié)果表明：5批黃芪藥材有8個(gè)共有峰，其HPLC指紋圖譜基本一致，其共有峰保留時(shí)間的相對(duì)比值基本一致，共有峰面積之和均大于各總峰面積的90％，但其共有峰面積的相對(duì)比值有一定差異。 采用大鼠肝微粒體和胃腸道內(nèi)容物體外孵化方法初步研究了黃酮類有效成分的

5、代謝途徑及降解速度，結(jié)果表明，毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮和芒柄花素在肝微粒體中代謝率為22.64％、31.18％、55.42％，表觀一級(jí)降解速度常數(shù)分別為0.267 h-1(r=0.992)、0.386 h-1(r=0.991)、0.826 h-1(r=0.996)：毛蕊異黃酮苷和芒柄花素在胃內(nèi)容物中的代謝率為33.45％、38.06％，表觀一級(jí)降解速度常數(shù)為0.198 h-1(r=0.962)、0.232 h-1(r=0.938)，毛蕊