豚鼠心室肌細(xì)胞膜延遲整流鉀通道電流（I-,k-）及L型鈣通道電流（I-,Ca,L-）在缺血預(yù)適應(yīng)過(guò)程中的變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該研究應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù),在模擬缺血及早期缺血預(yù)適應(yīng)條件下對(duì)豚鼠心室肌單細(xì)胞的延遲整流鉀電流I<,k>(分為快速激活成分I<,kr>和緩慢激活成分I<,ks>)和L型鈣通道電流(I<,Ca,L>)進(jìn)行分析.方法:用膠原酶Ⅰ分離出豚鼠心室肌單細(xì)胞.實(shí)驗(yàn)條件設(shè)定為:(1)無(wú)預(yù)適應(yīng)的缺血模型:細(xì)胞經(jīng)正常細(xì)胞外液灌流5min,記錄正常狀態(tài)離子通道電流為對(duì)照,再予模擬缺血細(xì)胞外液灌流10min,記錄缺血狀態(tài)離子通道電流.(2)缺血預(yù)適應(yīng)模型

2、:細(xì)胞經(jīng)正常細(xì)胞外液灌流5min,記錄正常狀態(tài)離子通道電流為對(duì)照后,先予缺血細(xì)胞外液灌流3min,再予正常細(xì)胞外液灌流(再灌注)3min,如此重復(fù)操作2次作為缺血預(yù)適應(yīng)刺激并記錄離子通道電流,再予模擬缺血細(xì)胞外液灌流10min,記錄預(yù)適應(yīng)后的缺血狀態(tài)離子通道電流.該實(shí)驗(yàn)共觀察記錄四組細(xì)胞:單純?nèi)毖狪k組(n=14)、缺血預(yù)適應(yīng)I<,k>組(n=10)、單純?nèi)毖狪<,Ca,L>組(n=12)和缺血預(yù)適應(yīng)I<,Ca,L>組(n=11).結(jié)論

3、:(1)急性持續(xù)心肌缺血使I<,k>增大,且以I<,kr>的增大為主.(2)缺血預(yù)適應(yīng)的刺激抑制了持續(xù)缺血時(shí)I<,k>的開(kāi)放,對(duì)I<,kr>的抑制更為顯著.(3)急性持續(xù)缺血使內(nèi)向I<,Ca,L>峰值電流減小,相應(yīng)外向穩(wěn)態(tài)電流I<,ss>增大,穩(wěn)態(tài)激活曲線略右移,不影響最大激活電位和反轉(zhuǎn)電位.(4)缺血預(yù)適應(yīng)刺激仍使I<,Ca,L>峰值電流減小,即短暫缺血后的再灌注不能使減小的I<,Ca,L>峰值恢復(fù),但限制了IP之后的持續(xù)缺血時(shí)I<,