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文檔簡介
1、目的:乳腺癌是當今女性最常見的惡性腫瘤。本研究通過觀察川芎嗪對裸鼠人乳腺癌MDA-MB-231皮下移植瘤模型中VEGF-A和VEGF-C表達的影響,探討其抑制腫瘤生長和抗乳腺癌血管生成的可能作用機制。
方法:
建立裸鼠人乳腺癌MDA-MB-231皮下移植瘤模型,隨機分成生理鹽水組、川芎嗪高劑量組、川芎嗪低劑量組,環(huán)磷酰胺組,造模成功后開始給藥,生理鹽水組給予生理鹽水0.2ml腹腔注射,1次/日×3周;川芎嗪高
2、劑量組給予0.2ml腹腔注射,200mg/kg,1次/日×3周,川芎嗪低劑量組給予0.2ml腹腔注射,50mg/kg,1次/日×3周,環(huán)磷酰胺組給予0.2ml腹腔注射,100mg/kg,每周1次,注射3周。第3周實驗結(jié)束時,頸椎脫臼法處死裸小鼠,解剖裸小鼠,觀察乳腺移植瘤局部生長情況,取瘤組織,免疫組化染色CD34,計數(shù)MVD,觀察腫瘤血管生成情況,同時運用免疫組化和RT-PCR的方法,檢測瘤組織中VEGF-A和VEGF-C的蛋白和mR
3、NA的表達。
結(jié)果:
1.裸鼠一般情況觀察
24只實驗動物均成活。除環(huán)磷酰胺組外,其他各組未出現(xiàn)精神萎靡,攝食、攝水減少。
2、瘤塊組織解剖學和病理學觀察
解剖學觀察發(fā)現(xiàn):腫瘤切面為灰白色,并可見大量壞死區(qū)。病理學觀察提示:腫瘤組織為乳腺浸潤性導管癌。
3、裸鼠瘤塊體積(V=長徑×短徑2cm3/2)
川芎嗪高、低劑量組瘤塊體積與生理鹽水組之
4、間差異顯著性(P<0.01)。
4、裸鼠瘤塊質(zhì)量及抑瘤率
川芎嗪高、低劑量組瘤重與生理鹽水組之間差異顯著性(P<0.01)。川芎嗪高、低劑量組腫瘤抑制率分別為36.5%、35.3%。
5、藥物干預后各組MVD
川芎嗪高、低劑量組MVD與生理鹽水組之間差異顯著性(P<0.05),與環(huán)磷酰胺組之間差異無顯著性(P>0.05)。川芎嗪高、低劑量組MVD抑制率為31.6%和29.6%。
5、r> 6、川芎嗪對裸鼠移植瘤VEGF-A、VEGF-C蛋白表達的影響
川芎嗪組中VEGF-A、VEGF-C的陽性表達強度明顯弱于生理鹽水組。
7、川芎嗪對裸鼠移植瘤VEGF-AmRNA、VEGF-C mRNA表達量的影響
川芎嗪高、低劑量組VEGF-A/β-actin和VEGF-C/β-actin的光密度比值與生理鹽水組之間差異顯著性(P<0.01),川芎嗪高、低劑量組VEGF-/β-ac
6、tin下調(diào)比例為21.0%與20.0%,川芎嗪高、低劑量組VEGF-C/β-actin下調(diào)比例為21.7%與19.9%。
8、裸鼠移植瘤組織中VEGF-A mRNA和VEGF-C mRNA表達量的關(guān)系
生理鹽水組、川芎嗪低劑量組、川芎嗪高劑量組、環(huán)磷酰胺組四組共24例標本,VEGF-A mRNA和VEGF-C mRNA呈正相關(guān),r=0.914,且P<0.01,有統(tǒng)計學意義。
結(jié)論:
7、 (1)川芎嗪明顯抑制裸鼠移植瘤的生長:抑瘤率與生理鹽水對照組有顯著差異,低于環(huán)磷酰胺組,但川芎嗪對裸鼠的生長沒有明顯的影響。
(2)川芎嗪明顯抑制裸鼠腫瘤新生血管的形成:川芎嗪抑血管的效率與環(huán)磷酰胺組無顯著性差異。
(3)經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),VEGF-A和VEGF-C呈正相關(guān),在乳腺癌疾病的演變中可能具有協(xié)同作用。
(4)川芎嗪下調(diào)乳腺癌VEGF-A和VEGF-C的蛋白及mRNA的表達,可能是其
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