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文檔簡介
1、目的:研究基質金屬蛋白酶-25(matrix metalloproteinase-25,MMP-25)在正常早期妊娠和自然流產患者絨毛及蛻膜組織中的表達特點,探討其在胚胎植入中的作用及其與自然流產的關系。 方法:選擇2006年8月至2007年6月來山東大學齊魯醫(yī)院計劃生育科就診的60例正常早期妊娠婦女和40例自然流產患者,收取上述研究對象手術后的妊娠絨毛及蛻膜組織經PBS液沖洗后置液氮中快速冷存分別提取RNA,采用半定量RT-P
2、CR技術檢測兩組絨毛及蛻膜組織中MMP-25mRNA的表達量;另取適量組織置于4%多聚甲醛液中固定,行石蠟包埋,免疫組織化學法檢測MMP-25蛋白在兩組絨毛及蛻膜組織中的分布情況。 結果:1、MMP-25mRNA在正常早期妊娠的絨毛及蛻膜組織中均有表達,并且絨毛組織中MMP-25mRNA表達水平隨妊娠周數(shù)的增加逐漸上升,各孕周組間相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 2、自然流產組的絨毛及蛻膜組織中MMP-25mRNA
3、的表達量明顯低于正常妊娠組。兩組的表達量分別為0.17±0.06和0.11±0.02;0.26±0.07和0.11±0.03,兩組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 3、正常早期妊娠組及自然流產組的絨毛組織中MMP-25的染色均呈陽性,但染色的部位及強度有顯著差異。正常妊娠組,MMP-25主要定位于細胞滋養(yǎng)細胞和合體滋養(yǎng)細胞,且妊娠第5周表達呈弱陽性,隨后表達逐漸增強,第10周呈強陽性表達,表達趨勢與RT-PCR結果吻合,細
4、胞滋養(yǎng)細胞和合體滋養(yǎng)細胞排列緊密;而自然流產組僅合體滋養(yǎng)細胞中有表達,細胞滋養(yǎng)細胞則未見表達,絨毛組織中細胞滋養(yǎng)細胞和合體滋養(yǎng)細胞排列稀疏。兩組平均光密度(0D)分別為0.21±0.02和0.13±0.04,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 4、正常早期妊娠組及自然流產組的蛻膜組織中,MMP-25均主要表達于腺上皮細胞,但自然流產組的蛻膜組織中MMP-25表達微弱,兩組平均光密度(0D)分別為0.25±0.13和0.21±0.
5、12,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論: MMP-25在人絨毛和蛻膜組織中均有表達。MMP-25mRNA在正常早期妊娠絨毛組織中的表達水平隨妊娠周數(shù)的增加逐漸上升,表達變化與滋養(yǎng)細胞浸潤活性呈正相關。免疫組化示MMP-25分布于細胞滋養(yǎng)細胞和合體滋養(yǎng)細胞,進一步說明MMP-25可能與絨毛的浸潤功能密切相關。另外,在胚胎植入過程中,子宮內膜的ECM發(fā)生了廣泛的重塑過程,本實驗通過觀察蛻膜組織中MMP-25的分布發(fā)現(xiàn),ICM
6、P-25在蛻膜組織的腺上皮細胞呈陽性表達,與其水解底物Ⅳ型膠原分布具有高度一致性,提示,MMP-25參與子宮內膜細胞外基質降解,從而有利于絨毛滋養(yǎng)層細胞穿透母體子宮內膜。因此,對于正常早期妊娠絨毛及蛻膜組織的研究提示MMP-25可能參與胚胎植入及胎盤形成過程中滋養(yǎng)細胞浸潤活性調控及子宮內膜組織重膜組織重構。而自然流產組MMP-25mRNA的表達量降低,并且絨毛組織中MMP-25僅合體滋養(yǎng)細胞中有表達,染色強度弱于正常妊娠組,表明絨毛滋養(yǎng)
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