基質(zhì)金屬蛋白酶—25在早孕絨毛和蛻膜中的表達(dá)及意義的研究.pdf

1、目的:研究基質(zhì)金屬蛋白酶-25(matrix metalloproteinase-25，MMP-25)在正常早期妊娠和自然流產(chǎn)患者絨毛及蛻膜組織中的表達(dá)特點(diǎn)，探討其在胚胎植入中的作用及其與自然流產(chǎn)的關(guān)系。 方法:選擇2006年8月至2007年6月來山東大學(xué)齊魯醫(yī)院計(jì)劃生育科就診的60例正常早期妊娠婦女和40例自然流產(chǎn)患者，收取上述研究對(duì)象手術(shù)后的妊娠絨毛及蛻膜組織經(jīng)PBS液沖洗后置液氮中快速冷存分別提取RNA，采用半定量RT-P

2、CR技術(shù)檢測兩組絨毛及蛻膜組織中MMP-25mRNA的表達(dá)量；另取適量組織置于4％多聚甲醛液中固定，行石蠟包埋，免疫組織化學(xué)法檢測MMP-25蛋白在兩組絨毛及蛻膜組織中的分布情況。 結(jié)果:1、MMP-25mRNA在正常早期妊娠的絨毛及蛻膜組織中均有表達(dá)，并且絨毛組織中MMP-25mRNA表達(dá)水平隨妊娠周數(shù)的增加逐漸上升，各孕周組間相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2、自然流產(chǎn)組的絨毛及蛻膜組織中MMP-25mRNA

3、的表達(dá)量明顯低于正常妊娠組。兩組的表達(dá)量分別為0.17±0.06和0.11±0.02；0.26±0.07和0.11±0.03，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3、正常早期妊娠組及自然流產(chǎn)組的絨毛組織中MMP-25的染色均呈陽性，但染色的部位及強(qiáng)度有顯著差異。正常妊娠組，MMP-25主要定位于細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞，且妊娠第5周表達(dá)呈弱陽性，隨后表達(dá)逐漸增強(qiáng)，第10周呈強(qiáng)陽性表達(dá)，表達(dá)趨勢與RT-PCR結(jié)果吻合，細(xì)

4、胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞排列緊密；而自然流產(chǎn)組僅合體滋養(yǎng)細(xì)胞中有表達(dá)，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞則未見表達(dá)，絨毛組織中細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞排列稀疏。兩組平均光密度(0D)分別為0.21±0.02和0.13±0.04，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4、正常早期妊娠組及自然流產(chǎn)組的蛻膜組織中,MMP-25均主要表達(dá)于腺上皮細(xì)胞，但自然流產(chǎn)組的蛻膜組織中MMP-25表達(dá)微弱，兩組平均光密度(0D)分別為0.25±0.13和0.21±0.

5、12，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論: MMP-25在人絨毛和蛻膜組織中均有表達(dá)。MMP-25mRNA在正常早期妊娠絨毛組織中的表達(dá)水平隨妊娠周數(shù)的增加逐漸上升，表達(dá)變化與滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤活性呈正相關(guān)。免疫組化示MMP-25分布于細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞，進(jìn)一步說明MMP-25可能與絨毛的浸潤功能密切相關(guān)。另外，在胚胎植入過程中，子宮內(nèi)膜的ECM發(fā)生了廣泛的重塑過程，本實(shí)驗(yàn)通過觀察蛻膜組織中MMP-25的分布發(fā)現(xiàn)，ICM

6、P-25在蛻膜組織的腺上皮細(xì)胞呈陽性表達(dá)，與其水解底物Ⅳ型膠原分布具有高度一致性，提示,MMP-25參與子宮內(nèi)膜細(xì)胞外基質(zhì)降解，從而有利于絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞穿透母體子宮內(nèi)膜。因此，對(duì)于正常早期妊娠絨毛及蛻膜組織的研究提示MMP-25可能參與胚胎植入及胎盤形成過程中滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤活性調(diào)控及子宮內(nèi)膜組織重膜組織重構(gòu)。而自然流產(chǎn)組MMP-25mRNA的表達(dá)量降低，并且絨毛組織中MMP-25僅合體滋養(yǎng)細(xì)胞中有表達(dá)，染色強(qiáng)度弱于正常妊娠組，表明絨毛滋養(yǎng)