間充質干細胞對肝腫瘤細胞力生物學行為的影響及相關機理研究.pdf

1、 間充質干細胞對肝腫瘤細胞 力生物學行為的影響及相關機理研究 重慶大學碩士學位論文 （學術學位） 學生姓名：李曉明 指導教師：宋關斌 教 授 羅 慶 博 士 專 業(yè)：生物學 學科門類：理 學 重慶大學生物工程學院 二 O 一四年四月 重慶大學碩士學位論文 中文摘要 I 摘 要 間充質干細胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的多能干細胞，

2、在特定誘導條件下能分化為成骨、軟骨、脂肪、肌肉等多種細胞。 MSCs 能被募集到炎癥環(huán)境和損傷組織位點， 通過抗炎、 旁分泌、 增殖、分化等多種作用在損傷組織的修復和再生中扮演重要角色，也是基因傳遞和細胞治療的重要工具。近年來，MSCs 已成為損傷組織修復、再生等組織工程研究中應用最多的干細胞類型。 惡性腫瘤是細胞周期紊亂和細胞分裂、生長失控引起的一種致命疾病，嚴重危害人類健康，其預防和治療目前仍然是臨床上面臨的巨大挑戰(zhàn)問題。炎性微環(huán)境

3、是腫瘤組織的重要特征之一，正常組織發(fā)生惡變也可被視為一種特殊的組織損傷， 因此， 腫瘤組織也能募集 MSCs 參與腫瘤微環(huán)境的重塑, 并對腫瘤細胞的生物學行為產(chǎn)生重要影響。 腫瘤細胞與 MSCs 之間的交互對話及相互影響成為近年來腫瘤領域的研究熱點，但是，目前人們對于 MSCs 如何參與腫瘤微環(huán)境的重建以及 MSCs 如何影響腫瘤細胞的生物學行為還缺乏系統(tǒng)認識。因此，本文主要研究大鼠肝腫瘤細胞CBRH-7919 在 MSCs 微環(huán)境下增

4、殖、遷移等生物學行為的變化特征，并對其相關分子機理進行深入探討。本研究工作的主要內(nèi)容和結果如下： 1. 細胞分離、培養(yǎng) 采用 Percoll 密度梯度離心與差時貼壁相結合的方法分離大鼠 MSCs， 用含 10% 胎牛血清的 L-DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)、傳代。培養(yǎng)的細胞形態(tài)均一，呈現(xiàn)出 MSCs 特有的漩渦狀分布。通過流式細胞儀對分離培養(yǎng)細胞表面相關抗原的表達進行分析，結果顯示：CD44 和 CD90 表面抗原呈陽性表達，而 CD34 呈

5、陰性表達。 大鼠肝癌細胞株 CBRH-7919，用含 10% 胎牛血清的 L-DMEM 培養(yǎng)基按常規(guī)方法傳代培養(yǎng)。 2. MSCs 條件培養(yǎng)基對 CBRH-7919 細胞遷移的影響 利用 transwell 方法考察了 MSCs 條件培養(yǎng)基 （Conditioned medium from MSCs, MSC-CM）對 CBRH-7919 細胞遷移行為的影響。實驗結果發(fā)現(xiàn)，與對照組比較，CBRH-7919 細胞在 MSC-CM 誘導條