低頻rTMS對免疫介導(dǎo)的MND豚鼠的治療作用及其機(jī)制研究.pdf

1、第一部分：低頻rTMS對免疫介導(dǎo)的MND豚鼠生存時(shí)間和運(yùn)動(dòng)功能的影響
　　 目的：觀察低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激（rTMS）對免疫介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元?。∕ND）豚鼠生存時(shí)間和運(yùn)動(dòng)功能的影響，探討低頻rTMS對肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）的治療作用。
　　 方法：新鮮的牛脊髓前角勻漿免疫豚鼠建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫灰質(zhì)病（EAGMD）模型。將發(fā)病高峰期（第2次免疫后2-4周）豚鼠隨機(jī)分為治療組和假治療組。治療組豚鼠給予1Hz rTMS治療2

2、周（每周連續(xù)5天），假治療組豚鼠給予假治療2周(每周連續(xù)5天)，分別于治療前、后利用斜板試驗(yàn)評價(jià)其運(yùn)動(dòng)功能。同時(shí)觀察并比較兩組動(dòng)物的生存時(shí)間。
　　 結(jié)果：治療組中部分個(gè)體治療后第2天斜板度數(shù)較治療前有好轉(zhuǎn)，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療結(jié)束后第9天測量斜板度數(shù)繼續(xù)下降（P＜0.05）。治療后治療組斜板度數(shù)優(yōu)于假治療組（P＜0.05），但兩組之間的生存時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 結(jié)論：低頻rTMS

3、治療可以延緩EAGMD豚鼠運(yùn)動(dòng)功能的惡化，但對其生存時(shí)間
　　 未顯示出明顯的延長作用。低頻rTMS對ALS具有一定的治療作用。
　　 第二部分：低頻rTMS對免疫介導(dǎo)的MND豚鼠Glu能和GABA能神經(jīng)元的影響
　　 目的：研究低頻rTMS對免疫介導(dǎo)的MND模型豚鼠病變部位的谷氨酸（glutamic acid，Glu）能和γ氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid，GABA）能神經(jīng)元的影響，初步

4、探討低頻rTMS的作用機(jī)制，為低頻rTMS治療ALS提供理論依據(jù)。
　　 方法：新鮮的牛脊髓前角勻漿免疫豚鼠建立EAGMD模型。發(fā)病早期治療組給予1Hz rTMS治療2周(每周連續(xù)5天)，治療前、后應(yīng)用斜板試驗(yàn)評價(jià)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能。治療后利用免疫組化方法光鏡下分別比較治療組、假治療組和對照組三組豚鼠之間的大腦皮層、頸膨大和腰膨大等部位Glu能和GABA能神經(jīng)元的數(shù)目和平均光密度值的差別。
　　 結(jié)果：治療組經(jīng)過2周1Hz

5、rTMS治療后大腦皮層、頸膨大和腰膨大Glu能神經(jīng)元數(shù)目較假治療組少，平均光密度值較假治療組低，但較對照組恰相反。治療組GABA能神經(jīng)元結(jié)果與Glu能神經(jīng)元相反。
　　 結(jié)論：興奮性氨基酸的毒性參與免疫介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷過程。低頻rTMS具有抑制Glu能神經(jīng)元和增強(qiáng)GABA能神經(jīng)元的作用，通過對興奮性和抑制性神經(jīng)元作用的調(diào)整，從而對ALS起到治療作用。
　　 第三部分：低頻rTMS對免疫介導(dǎo)的MND豚鼠線粒體的

6、　　 保護(hù)作用
　　 目的：探討低頻rTMS對免疫介導(dǎo)的MND豚鼠病變部位線粒體的作用及其機(jī)制，為低頻rTMS治療ALS提供理論依據(jù)。
　　 方法：新鮮的牛脊髓前角勻漿免疫豚鼠建立EAGMD模型。發(fā)病早期治療組給予1Hz rTMS治療2周后處死，透射電鏡觀察治療組、假治療組和對照組之間的形態(tài)學(xué)改變。利用差速離心法分別提取大腦皮層和脊髓頸、腰膨大處線粒體后制成勻漿。分析并比較三組之間相應(yīng)部位線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活

7、性。
　　 結(jié)果：電鏡顯示免疫介導(dǎo)的MND豚鼠病變部位線粒體可發(fā)生腫脹、線粒體嵴模糊不清或呈空泡樣改變等形態(tài)學(xué)變化，這些改變在假治療組更常見到。治療后，治療組線粒體SDH活性與假治療組和對照組之間均有顯著性差異(P＜0.05）。
　　 結(jié)論：線粒體障礙參與EAGMD的損傷過程，除形態(tài)學(xué)變化外，線粒體SDH活性下降。低頻rTMS可以增強(qiáng)線粒體SDH活性，對線粒體起到一定的保護(hù)作用，這可能是低頻rTMS治療ALS有效的另一機(jī)