大鼠中央杏仁核促胰液素的電生理效應(yīng)及其對(duì)攝食行為的調(diào)控.pdf

1、杏仁核是位于哺乳動(dòng)物端腦的杏仁核復(fù)合體，根據(jù)解剖學(xué)和功能學(xué)的不同，分為中央杏仁核（central amygdala，CeA），外側(cè)杏仁核（lateral amygdala，LA）和杏仁核基底核（basal amygdala，BA）。中央杏仁核含有葡萄糖敏感神經(jīng)元，參與攝食和體重調(diào)節(jié)。促胰液素（secretin）是由27個(gè)氨基酸組成的肽，屬于促胰液素/胰高血糖素肽類超家族。中央杏仁核高表達(dá)促胰液素和促胰液素受體。研究發(fā)現(xiàn)小鼠腹腔和腦室給予

2、促胰液素均可抑制攝食。
　　目的：探討大鼠中央杏仁核促胰液素的電生理效應(yīng)及其對(duì)攝食行為的調(diào)控。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)采用多管微電極在體細(xì)胞外電生理記錄技術(shù)和攝食行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法。
　　結(jié)果：1.在記錄到的27個(gè)大鼠中央杏仁核神經(jīng)元中，微壓力注射0.1μM促胰液素可使13個(gè)神經(jīng)元（48.15％）自發(fā)放電頻率明顯增加，放電頻率由2.30±0.91Hz增加至3.20±1.07Hz（P<0.001）。放電頻率平均增加104.22±2

3、6.18%，與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。此外，促胰液素使6個(gè)神經(jīng)元（22.22%）自發(fā)放電頻率明顯降低，放電頻率由6.03±2.13Hz降低至2.20±1.39Hz（P<0.05），平均降低68.80±12.10%，與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。大鼠中央杏仁核微壓力注射高濃度（0.1mM）促胰液素，可使所記錄到的15個(gè)神經(jīng)元自發(fā)放電頻率平均升高228.42±48.40%，興奮效應(yīng)明顯強(qiáng)于0.1

4、μM促胰液素（P<0.05）。
　　2.中央杏仁核神經(jīng)元有兩種放電模式：簇狀放電和不規(guī)則放電。為了觀察促胰液素是否影響大鼠中央杏仁核神經(jīng)元放電模式，我們分析了給藥前后神經(jīng)元自發(fā)放電間隔（inter-spike interval，ISI）的變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）和法諾因子（fano factor，F(xiàn)F）值。在促胰液素產(chǎn)生興奮效應(yīng)的中央杏仁核神經(jīng)元，加藥前CV值與加藥后CV相比沒有明顯變化，

5、差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（加藥前：1.19±0.16；加藥后：1.17±0.16；P>0.05），同時(shí)觀察到FF值也沒有明顯改變（加藥前：2.74±0.80；加藥后：1.79±0.52；P>0.05）。同樣，在促胰液素產(chǎn)生抑制效應(yīng)的中央杏仁核神經(jīng)元，加藥前CV值與加藥后CV相比沒有明顯變化，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（加藥前：1.03±0.08；加藥后：1.29±0.12；P>0.05），同時(shí)觀察到FF值也沒有明顯改變（加藥前：0.64±0.43；加藥后

6、：2.60±1.53；P>0.05）。
　　3.在記錄到的117個(gè)中央杏仁核神經(jīng)元中，微壓力注射0.5M葡萄糖使16個(gè)神經(jīng)元（13.68%）放電頻率明顯降低，為葡萄糖敏感神經(jīng)元。在這16個(gè)葡萄糖敏感神經(jīng)元中，促胰液素可使其中7個(gè)神經(jīng)元（基礎(chǔ)放電：4.15±1.28Hz，葡萄糖：2.15±0.79Hz，P<0.05，n=7）自發(fā)放電頻率明顯降低，放電頻率由5.31±1.48Hz降低至1.74±1.01Hz（P<0.01），平均降低7

7、5.32±10.47%，與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。
　　4.在清醒動(dòng)物攝食測(cè)試實(shí)驗(yàn)中，雙側(cè)中央杏仁核微量注射0.1μM促胰液素（0.5μl/側(cè)）顯著降低大鼠攝食量，在觀察的第1h，2h，4h和12h的攝食量明顯低于生理鹽水對(duì)照組，分別降低46.08±8.54%（P<0.001），44.41±8.87%（P<0.01），54.00±6.76%（P<0.001）和35.66±9.49%（P<0.01）。在另一

8、組實(shí)驗(yàn)，分別觀察了大鼠雙側(cè)中央杏仁核微量注射10μM H89（cAMP激活的蛋白激酶抑制劑）以及H89和促胰液素混合物對(duì)攝食量的影響。結(jié)果顯示與單獨(dú)給予H89相比，中央杏仁核注射H89和促胰液素混合物對(duì)大鼠攝食量沒有明顯影響（1h，2h，4h和12h，P>0.05，n=11），提示促胰液素可能是通過cAMP-PKA途徑抑制攝食。
　　結(jié)論：電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示促胰液素可以直接興奮大部分中央杏仁核神經(jīng)元，而抑制中央杏仁核內(nèi)葡萄糖敏感神經(jīng)