PTSD大鼠杏仁核神經(jīng)元凋亡及LTP變化的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文PTSD大鼠杏仁核神經(jīng)元凋亡及LTP變化的研究姓名：丁金蘭申請學位級別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學指導教師：石玉秀20090401能是水解突觸間隙的神經(jīng)遞質乙酰膽堿，維持神經(jīng)興奮性正常傳遞功能。乙酰膽堿缺乏可引起學習記憶功能低下。乙酰膽堿酯酶活性的改變可反應乙酰膽堿的變化。另外，文獻報道目前“單一連續(xù)刺激( s i n g l ep r o l o n g e d s t r e s s ，s v s ) ”

2、方法是P T S D 動物模型的首選理想方法，該方法已經(jīng)被國際所認同。因此本研究采用S P S方法刺激大鼠制作P T S D 模型，并研究刺激后各時間段凋亡相關基因B a x 和B c l 一2的表達及溶酶體標志酶T M P 、A C P 活性的改變，同時檢測L T P 和A C h E 的變化，旨在探討P T S D 大鼠杏仁核恐懼增強學習記憶的改變的發(fā)生機制。為揭示P T S D的發(fā)病機制提供實驗依據(jù)。實驗方法1 、模型制作及分組采

3、用2 0 0 5 年日本文部省召開的國際P T S D 科學會議確定的S P S 模型。其具體方法是將大鼠按下述步驟連續(xù)進行處理：固定刺激2 h ：強迫性游水2 0 m i n ，水深4 0 c m ，水溫2 5 。C ；休息1 5 m i n ；乙謎麻醉至意識喪失；無干擾空間常規(guī)喂養(yǎng)。隨機分為5 組，即正常對照組及S P S l d 、4 d 、7 d 、和1 4 d 組。2 、杏仁核B a x 、B c l - 2 的免疫組化、免疫

4、雙標、W e s t e r nB l o t t i n g及R T —P C R免疫組化：分別選取各組大鼠灌流固定、沉糖的大腦，制作石蠟切片，分別用P V 法進行杏仁核的B a x 、B c l ．2 免疫組織化學染色，D A B 顯色，中性樹膠封片，光學顯微鏡觀察，攝片。免疫雙標：分別選取各組大鼠灌流固定、沉糖的大腦，制作石蠟切片，然后進行雙標染色，甘油P B S 封片，共聚激光掃描焦顯微鏡( C L S M ) 下觀察，攝片。W