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文檔簡介
1、目的:觀察全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)對SD大鼠的免疫毒性影響及番茄紅素(lycopene,LP)對其致免疫毒性的干預效果,為闡明PFOS的免疫損傷和機制以及番茄紅素的保護作用提供實驗依據。
方法:健康成年SD大鼠48只,雌雄各半,隨機分為8組:溶劑對照組、低劑量PFOS染毒組、中劑量PFOS染毒組、高劑量PFOS染毒組、LP保護組、LP保護低劑量PFOS染毒組、LP保護中劑量P
2、FOS染毒組、LP保護高劑量PFOS染毒組;溶劑對照組和LP保護組均進食2%Tween-80處理后的普通飼料,實驗組分別進食低、中、高劑量(5、25、125mg/kgPFOS)的染毒飼料,溶劑對照組和各實驗組分別灌胃1%CMC-Na溶液,LP保護組和LP保護低、中、高劑量PFOS染毒組灌胃20mg/kg·bw LP混懸液,每天灌胃一次,一周五天,連續(xù)進行2個月;末次灌胃24h后,眼眶靜脈叢取血后處死大鼠,采用酶聯免疫吸附測定法(ELIS
3、A)檢測血清IFN-γ,IL-4含量;流式細胞儀分析外周血淋巴細胞亞群;滴片法測定腹腔巨嗜細胞吞噬功能;取胸腺、脾臟計算臟器系數;常規(guī)病理學切片,HE染色觀察脾臟組織形態(tài)學變化;制備脾細胞懸液,溶血空斑法檢測抗體形成細胞數、MTT法測定淋巴細胞增殖、LDH釋放法測NK細胞活性。
結果:
1.中、高劑量PFOS染毒組大鼠體重增長低于溶劑對照組,且隨PFOS劑量的增加其抑制體重增長越明顯(P<0.05);加入LP保護劑后
4、,LP保護低、中、高劑量PFOS染毒組動物的體重分別與同劑量的PFOS染毒組相比有所增長,但差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
2.中、高劑量PFOS染毒組脾臟、胸腺臟器系數與溶劑對照組比較降低(P<0.05),并呈劑量-效應關系;加入LP保護劑后,LP保護中、高劑量PFOS染毒組脾臟臟器系數與同劑量PFOS染毒組相比明顯升高,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而胸腺臟器系數與同劑量PFOS染毒組相比雖有所提高,但差別無統(tǒng)計學
5、意義(P>0.05)。
3.與溶劑對照組相比低、中、高劑量PFOS染毒組可降低大鼠抗體形成細胞數(P<0.05),并呈劑量-效應關系;加入LP保護劑后,LP保護低、中劑量PFOS染毒組與同劑量PFOS染毒組比較,其抗體形成細胞數升高,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
4.中、高劑量PFOS染毒組與溶劑對照組相比可降低大鼠淋巴細胞增殖能力、CD4+T細胞和CD4+/CD8+比值(P<0.05),并呈劑量-效應關系;加
6、入LP保護劑后,LP保護低、中、高劑量PFOS染毒組與同劑量PFOS染毒組比較,其淋巴細胞增殖能力、CD4+T細胞和CD4+/CD8+比值升高(P<0.05);高劑量的PFOS染毒組可降低大鼠腹腔巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬百分率、吞噬指數和CD8+細胞亞群,差別均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
5.與溶劑對照組相比,中、高劑量PFOS染毒組可降低大鼠NK細胞的活性(P<0.05),并呈劑量-效應關系;加入LP保護劑后,LP保護低
7、、中劑量PFOS染毒組NK細胞的活性與同劑量PFOS染毒組相比明顯升高,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
6.中、高劑量的PFOS染毒組與溶劑對照組相比可降低大鼠的IFN-γ的分泌水平(P<0.05),并呈劑量-效應關系,但對IL-4的降低不明顯(P>0.05);加入LP保護劑后,LP保護低、中、高劑量PFOS染毒組與同劑量PFOS染毒組比較,其IFN-γ、IL-4的分泌水平升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
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