東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛的鑒別方法及其類(lèi)緣關(guān)系研究.pdf

1、細(xì)辛（Asarum），是常用中藥，國(guó)家兩個(gè)重點(diǎn)中藥材之一。在中國(guó)吉林的長(zhǎng)白山脈主要分布著東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛，東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛在形態(tài)上難以區(qū)分，它們之間的親緣關(guān)系尚不清楚。為此，通過(guò)對(duì)出苗期的調(diào)查，切片實(shí)驗(yàn)，同工酶及 RAPD分析，對(duì)長(zhǎng)白山區(qū)的東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛進(jìn)行了類(lèi)緣分析，其結(jié)果如下：
　　1.在延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛的葉片、葉脈、葉柄基部的石蠟包埋切片實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，東北細(xì)辛葉柄基部的韌皮部和基本組織

2、之間存在著厚壁組織和晶體，而首爾細(xì)辛則無(wú)。因此，可以通過(guò)葉柄基部切片顯微結(jié)構(gòu)圖來(lái)區(qū)分東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛。
　　2.應(yīng)用垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳方法對(duì)東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛的5個(gè)樣本進(jìn)行過(guò)氧化物酶同工酶分析結(jié)果表明，東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛在酶譜上存在著較大差異。首爾細(xì)辛和東北細(xì)辛均有3條共有酶帶，首爾細(xì)辛比東北細(xì)辛多3～5條酶帶。由此，可以認(rèn)為東北細(xì)辛是古老種，而首爾細(xì)辛可能是東北細(xì)辛進(jìn)一步進(jìn)化而成的變種。進(jìn)一步進(jìn)行聚類(lèi)分析表明，東北細(xì)辛和

3、首爾細(xì)辛之間的遺傳距離較遠(yuǎn)（0.625）。
　　3.對(duì)東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛的5個(gè)樣本，利用隨機(jī)多態(tài)性DNA(RAPD)技術(shù)，選用了l2個(gè)10 bp引物共擴(kuò)增出72條多態(tài)性帶。根據(jù)72條多態(tài)性帶得到各樣本間的相似性系數(shù)，進(jìn)一步采用UPGMA法計(jì)算出各樣本間的遺傳距離。聚類(lèi)分析結(jié)果表明，東北細(xì)辛2個(gè)樣本間的遺傳距離最小（0.149）；首爾細(xì)辛3個(gè)樣本間的遺傳距離也較小，最大的為0.227；東北細(xì)辛和首爾細(xì)辛間的遺傳距離較大（0.503）