細辛腦亞微乳及其鼻腔噴霧系統(tǒng)的研究.pdf

1、α-細辛腦藥理活性強，臨床上用于肺炎、支氣管哮喘和慢性阻塞性肺病(慢阻肺，COPD)急性發(fā)作的治療。由于親脂性強，親水性差，市售口服制劑生物利用度僅2-5％，而小針注射液不僅臨床應(yīng)用依從性差，同時因處方中含高濃度的乙醇和吐溫-80作增溶劑，存在安全隱患。此外，本品吸收入血后60％以上的藥物快速分布至肝臟，長期應(yīng)用有引起肝毒性的危險。 目的：通過新型乳劑載體技術(shù)，將α-細辛腦制成水包油(O/W)亞微乳，提高藥物溶解度和載藥量，克服

2、非極性藥物因溶解度低而不利于制成液體制劑的缺陷，在此基礎(chǔ)上制備安全、穩(wěn)定、有效和方便的鼻腔噴霧劑，以改善藥物吸收和分布特征，提高用藥順應(yīng)性和生物有效性，降低毒副作用及不良反應(yīng)。 方法：①處方前研究采用“在體蟾蜍上腭粘膜法”，以去氧膽酸鈉為陽性對照，生理鹽水為陰性對照，考察α-細辛腦對纖毛持續(xù)擺動時間的影響；紫外分光光法考察藥物在水及植物油中的溶解度。②含藥亞微乳劑的研制將藥物溶于油相，高剪切乳化分散制備初乳，高壓均質(zhì)法制備亞微乳

3、。以乳劑粒徑、離心分層、zeta電勢等為優(yōu)化指標(biāo)，單因素考察乳化劑、穩(wěn)定劑、pH值、初乳制備條件及高壓均質(zhì)參數(shù)對乳劑穩(wěn)定性的影響；采用離體家兔鼻粘膜分配試驗，評價乳劑與粘膜親和性；正交設(shè)計優(yōu)化亞微乳處方及制備工藝。③質(zhì)量及安全性研究通過系統(tǒng)的質(zhì)量控制、穩(wěn)定性及刺激性考察，評價亞微乳質(zhì)量可控性、貯存穩(wěn)定性及鼻腔給藥安全性。④藥代動力學(xué)研究建立HPLC-MS/MS測定方法，進行系統(tǒng)方法學(xué)考察。比較亞微乳鼻腔給藥與市售小針劑注射給藥的藥時曲線

4、及組織分布特征。 結(jié)果：①與生理鹽水比較，藥物對纖毛持續(xù)擺動時間無明顯影響；α-細辛腦在水中溶解度為0_52mg/ml，大豆油中大于150mg/ml，中鏈油中大于200mg/ml。②通過單因素篩選，確定以卵磷脂/F68(1：2)為乳化劑，優(yōu)選用量2.5-3.5％；以油酸為穩(wěn)定劑，優(yōu)選用量為0.2％-2％；乳劑pH控制在6.0以上，滅菌前后粒徑無明顯變化，pH越高，粒徑穩(wěn)定性越好。采用高剪切乳化分散機比組織搗碎機更有利于初乳的粒徑

5、控制。高壓均質(zhì)次數(shù)對乳劑粒徑影響顯著，均質(zhì)次數(shù)越多，粒徑越小，但均質(zhì)6次以上，粒徑不再有明顯變化。離體家兔鼻粘膜分配試驗表明，乳化劑用量越高，粘膜親和性越強，乳劑粒徑越小，藥物分配到鼻粘膜的速率越快。正交試驗優(yōu)化結(jié)果表明，均質(zhì)壓力對乳劑制備影響最為顯著，其次為均質(zhì)溫度和乳化劑用量，藥物濃度影響較小。最優(yōu)組合為均質(zhì)壓力800bar、均質(zhì)溫度60℃、乳化劑用量3.5％和載藥量35mg/ml。③建立了乳劑質(zhì)量考察方法，優(yōu)化后的亞微乳劑pH為8

6、.5，粒徑分布均勻，平均粒徑為130nm，zeta電位為-33.9mv，乳劑粘度不隨剪切力變化而變化，為牛頓流體。經(jīng)室溫放置6個月，乳劑粒徑、pH、含量及有關(guān)物質(zhì)均未發(fā)生明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定。在體蟾蜍上腭粘膜試驗顯示，亞微乳鼻腔給藥后對纖毛持續(xù)擺動時間無明顯影響，與生理鹽水相當(dāng)；家兔眼內(nèi)滴入亞微乳后，12小時內(nèi)未見眼睛有紅腫、充血和流淚等刺激反應(yīng)。④采用HPLC-MS/MS測定體內(nèi)藥物濃度，內(nèi)源性物質(zhì)、內(nèi)標(biāo)及待測物分離良好；血漿最低可檢測

7、濃度為3ng.ml-1；在8ng.ml-1～8000ng.ml-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，日內(nèi)精密度為5.1～12.5％，日間為6.1～15.6％；方法回收率為98.55～103.38％，提取回收率為87.92～93.22％。家兔藥時曲線測定結(jié)果表明，市售小水針靜脈注射瞬間達峰，快速消除，符合三室模型；亞微乳鼻腔給藥5min達峰，峰濃度為靜脈注射的1/4，但消除變慢，絕對生物利用度為93％，符合二室模型。小鼠組織分布結(jié)果表明，小水針腹腔

8、注射以肝臟分布最高，腦和肺較低，而亞微乳鼻腔給藥以肺部分布最高，肝和腦較低。兩者相比，鼻腔給藥肺部濃度比注射給藥提高約2倍，而肝中濃度降低約1倍。 結(jié)論：通過系統(tǒng)處方及工藝優(yōu)化，制備了平均粒徑小于150nm、zeta電位低于-30mv、高溫高壓滅菌及長期貯存質(zhì)量穩(wěn)定、無明顯纖毛毒性和粘膜刺激性、載藥量高達30mg/ml以上的亞微乳劑。首次建立了HPLC-MS/MS體內(nèi)藥物測定方法，提高了檢測靈敏度和試驗準(zhǔn)確性。與注射給藥相比，鼻