模擬二氧化碳?xì)飧箤?duì)人腎癌786-0細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、自第一例腹腔鏡膽囊切除術(shù)在法國(guó)成功實(shí)施后,微創(chuàng)外科手術(shù)得到持續(xù)發(fā)展并不斷普及。由于該技術(shù)與傳統(tǒng)開放手術(shù)相比,具有術(shù)后疼痛輕、恢復(fù)時(shí)間短及良好的美容效果等優(yōu)點(diǎn),如今也用于活組織檢查和各種惡性腫瘤的切除。然而,近年來,關(guān)于以CO2為氣腹介質(zhì)的腹腔鏡技術(shù)是否會(huì)增加腫瘤腹腔播散和穿刺孔轉(zhuǎn)移成為爭(zhēng)論的焦點(diǎn),至今仍無(wú)定論。許多研究證實(shí)C02氣腹能改變?nèi)橄侔?、結(jié)腸癌、卵巢癌等惡性腫瘤的生物學(xué)行為,但是,到目前為止,有關(guān)CO2氣腹是否會(huì)影響腎癌的生物學(xué)

2、行為尚未見報(bào)道。
　　 本研究通過建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境,研究了CO2氣腹對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞體外增殖的影響及相關(guān)機(jī)制,為評(píng)估CO2氣腹腹腔鏡應(yīng)用于腎癌治療的安全性提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　 第一部分模擬CO2氣腹對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞體外增殖的影響
　　 目的:通過建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境,觀察CO2氣腹對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞體外增殖的影響。
　　 方法:建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境,以14mmHg氣

3、壓對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞作用不同時(shí)間(2h、4h),以培養(yǎng)于常規(guī)條件下腎癌細(xì)胞為對(duì)照,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化；MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期變化。
　　 結(jié)果:與對(duì)照組比較,CO2氣腹處理后的兩組人腎癌786-O細(xì)胞增殖速度明顯增快(P<0.05),細(xì)胞增殖指數(shù)顯著增高(P<0.01),且增殖指數(shù)與氣腹作用時(shí)間存在直線關(guān)系(R2=0.9840,P〈0.01),細(xì)胞周期中處于G0-G1期的細(xì)胞比例顯著降低(

4、P<0.05),而處于S期和G2-M期的細(xì)胞比例顯著增高(P<0.01)；兩氣腹組比較,4h組增殖速度顯著快于2h組(P<0.01),細(xì)胞周期中4h組中處于G0-G1期的細(xì)胞比例較2h組顯著降低(P<0.05),而處于S期和G2-M期的細(xì)胞比例較2h組顯著增高(P<0.05)。
　　 結(jié)論:體外模擬CO2氣腹環(huán)境,可促進(jìn)人腎癌786-O細(xì)胞增殖,且隨著接觸CO2時(shí)間的延長(zhǎng),腎癌786-O細(xì)胞增殖速度加快。
　　 第二部分

5、模擬CO2氣腹對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞PCNA、Survivin和Caspase-3表達(dá)的影響
　　 目的:通過建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境,研究CO2氣腹促進(jìn)人腎癌786-O細(xì)胞體外增殖的相關(guān)機(jī)制。
　　 方法:建立模擬CO2氣腹環(huán)境,以14mmHg氣壓對(duì)人腎癌786-O細(xì)胞分別作用2h和4h,設(shè)未處理組為對(duì)照,RT-PCR檢測(cè)各組SurvivinmRNA表達(dá)情況,免疫細(xì)胞SP法檢測(cè)各組PCNA、Survivin和Casp