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文檔簡介
1、目的:通過模擬腹腔鏡手術(shù)建立人工體外氣腹環(huán)境,利用不同氣腹壓力下CO2對肝癌細胞體外侵襲性進行研究,探討肝癌腹腔鏡切除的腫瘤安全性以及低壓氣腹、免氣腹肝癌切除的臨床應(yīng)用前景。
方法:建立體外CO2氣腹模擬環(huán)境,選用人肝癌細胞株SMMC-7721,分別在6、9、12、15mmHg不同壓強CO2氣腹環(huán)境及常規(guī)培養(yǎng)環(huán)境中作用1小時；用Transwell侵襲小室及MTT比色法來檢測模擬不同壓力CO2氣腹對體外培養(yǎng)的肝癌SMMC-7
2、721細胞侵襲、遷移和黏附能力的影響；并用免疫細胞化學(xué)方法檢測各組肝癌SMMC-7721細胞在不同壓力CO2氣腹環(huán)境作用后,不同時相點基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9和血管內(nèi)皮生長因子VEGF蛋白表達變化的情況,分析不同壓力CO2氣腹環(huán)境下對肝癌細胞體外侵襲作用的影響。
結(jié)果:各實驗組均隨CO2壓力的增強其侵襲、遷移及黏附能力逐步提高,9mmHg組與對照組相比黏附能力顯著提高(P<0.01),12mmHg組與對照組相比侵襲及黏附能
3、力顯著提高(分別為P<0.05和P<0.01),15mmHg組與對照組相比其侵襲、遷移及黏附能力均得到顯著增強(分別為P=0.008、P=0.015及P<0.01)；細胞黏附能力在培養(yǎng)48h后達高峰,隨后下降在72h時低于處理后水平(12mmHg組及15mmHg組均P<0.05)；免疫細胞化學(xué)其基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9和血管內(nèi)皮生長因子VEGF蛋白的表達,隨CO2作用壓力升高而逐漸增多,9mmHg組、12mmHg組和15mmHg組中與對
4、照組相比MMP-9蛋白表達顯著升高(P<0.01),12mmHg組和15mmHg組與對照組相比VEGF蛋白表達顯著升高(P<0.01)；MMP-9及VEGF蛋白表達在CO2氣腹作用后逐漸升高,24h達高峰,隨后下降。
結(jié)論:較高壓力的CO2氣腹環(huán)境對肝癌SMMC-7721細胞侵襲有顯著促進作用,可能與CO2氣腹顯著促進肝癌SMMC-7721細胞MMP-9及VEGF表達有關(guān)；腹腔鏡肝癌切除術(shù)可盡量使用低壓氣腹、免氣腹,以降低
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