宮頸上皮癌變過程中COX-2、HPV16-E6蛋白的表達及臨床意義.pdf

1、目的： 宮頸癌是全球婦女中最常見的惡性腫瘤之一，占女性生殖器官惡性腫瘤的首位。宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervicalintraepithelial neoplasia，CIN)發(fā)展至宮頸癌需經(jīng)歷很長一段時間，晚期及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移病例預(yù)后差。近年來宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的發(fā)病率有上升趨勢，尤其是年輕宮頸癌的發(fā)病率明顯升高。普遍認(rèn)為HPV癌蛋白(E6、E7)在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中起主要作用。高危型HPV16編碼的E6蛋白與P53蛋白結(jié)合，使其失活

2、，導(dǎo)致細胞增殖。E7蛋白可致細胞過度生長。E6可增加E7基因轉(zhuǎn)化上皮細胞的能力。但研究表明單一HPV感染不足以形成CIN或?qū)m頸癌，不能忽視其他協(xié)同因素。環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)是20世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)的一種與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的酶。給予特異性COX-2抑制劑可降低某些腫瘤的發(fā)病。研究表明，COX-2表達上調(diào)及HPV感染都是宮頸癌發(fā)病的早期事件。本實驗以免疫組化方法檢測了HPV16-E6蛋白及CO

3、X-2在宮頸慢性炎、CIN、浸潤癌各組中的表達情況及二者的相關(guān)性，以及二者與宮頸癌年齡、分期、分化等臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。探討HPV16-E6、COX-2在宮頸癌發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用，為COX-2抑制劑和HPV疫苗在宮頸癌防治中的治、療應(yīng)用提供有力的理論依據(jù)和實驗基礎(chǔ)。 方法： 本研究標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2004年6月-2006年6月間就診于婦科、初診的宮頸癌患者45例，術(shù)后均經(jīng)病理確診，病歷資料完整。其

4、中鱗癌36例，腺癌6例，腺鱗癌及透明細胞癌3例。根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2000)標(biāo)準(zhǔn)分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期17例，Ⅲ期3例。選擇同期因婦科良性疾病手術(shù)治療或門診治療患者的正常宮頸組織21例，宮頸慢性炎癥73例，CIN26例。病歷資料完整。所有標(biāo)本于離體半小時內(nèi)取材，以10％中性甲醛固定，石蠟包埋，切片備用。應(yīng)用免疫組化S-P法檢測COX-2和HPV16-E6蛋白在不同宮頸病變組織中的表達情況及其與宮頸癌臨床病理特征之間的關(guān)系，分

5、析二者之間的相關(guān)性。應(yīng)用SAS8.1統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)，采用X<'2>檢驗、確切概率法、多個樣本率比較的X<'2>分割法、Spearman等級相關(guān)法進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果： 1 COX-2在不同宮頸病變組織中的表達：在正常宮頸、宮頸炎、CIN、宮頸癌各組中，COX-2的陽性表達率分別為0％、36.99％、38.46％、64.44％，四組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X<'2>=25.50，P<0.0001)。經(jīng)X<'2>分割后比較

6、(α'=0.008333)，宮頸癌組的陽性率明顯高于宮頸炎組及正常宮頸組，有顯著性差異(分別為X<'2>=8.42，P=0.0037；X<'2>=24.14，P<0.0001)。CIN組明顯高與正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=8.09，P=0.0044)。宮頸炎組明顯高于正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=10.89，P=0.001)。 2 HPV16-E6蛋白在不同宮頸病變組織中的表達：在正常宮頸、宮頸炎、CIN、宮頸

7、癌各組中，HPV16-E6蛋白的陽性表達率分別為0.5％、38.35％、46.15％、71.11％，四組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X<'2>=27.50，P<0.0001)。經(jīng)X<'2>分割后比較(α'=0.008333)，宮頸癌組的陽性率明顯高于宮頸炎組及正常宮頸組，有顯著性差異(分別為X<'2>=11.95，P=0.0005；X<'2>=25.21．P<0.0001)。CIN組明顯高與正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=9.95，P=

8、0.0016)。宮頸炎組明顯高于正常宮頸組，有顯著性差異(X<'2>=8.63，P=0.0033)。 3 COX-2的表達與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：COX-2的陽性表達率在<45歲和≥45歲患者中分別為57.69％、73.68％，二者相比無顯著性差異(X<'2>=1.22，P>0.05)；在鱗癌、腺癌及其他病理類型中分別為67.65％、62.5％、33.3％，三者相比無顯著性差異(X<'2>=1.43，P>0.05)；在高分化、中

9、分化、低分化組織中分別為75.0％、65.0％、53.85％，三者相比無顯著性差異(X<'2>=1.22，P>0.05)；在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中分別為60.0％、70.59％、66.67％，三者相比無顯著性差異(X<'2>=0.05，P>0.05)；腫瘤直徑<4cm和≥4cm分別為68.75％、53.85％，二者相比無顯著性差異(X<'2>=0.36，P>0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者分別為85.0％、48.0％，二者相比有顯著

10、性差異(X<'2>=6.63，P<0.05)；有宮旁或脈管浸潤與無宮旁或脈管浸潤的組織中分別為78.95％、53.85％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=4.60，P<0.05)；淺肌層和深肌層浸潤分別為50.0％、84.21％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=5.60，P<0.05)。 4 HPV16-E6蛋白的表達與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：陽性表達率在高分化、中分化、低分化組織中分別為83.33％、70.0％、61

11、.54％，三者相比無顯著性差異(X<'2>=1.46，P>0.05、)；在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期中分別為68.0％、76.47％、66.67％，三者相比無顯著性差異(X<'2>=0.39，P>0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者分別為65.0％、76.0％，二者相比無顯著性差異(X<'2>=0.65，P>0.05)；腫瘤直徑<4cm和≥4cm分別為78.13％、53.85％，二者相比無顯著性差異(X<'2>=1.60，P>0.05)；淺肌

12、層和深肌層浸潤分別為69.23％、73.68％，二者相比無顯著性差異(X<'2>=0.11，P>0.05)；在<45歲和≥45歲患者中分別為57.65％、89.47％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=5.39，P<0.05)；在鱗癌與非鱗癌中分別為88.24％、18.18％，二者相比有顯著性差異(X<'2>=16.59，P<0.05)；有宮旁或脈管浸潤與無宮旁或脈管浸潤的組織中分別為89.47％、57.69％，二者相比有顯著性差異(X

13、<'2>=5.40，P<0.05)。 5 COX-2和HPV16-E6蛋白在不同宮頸病變組織中表達的相關(guān)性：在宮頸炎組、宮頸癌組，COX-2和HPV16-E6蛋白的表達均呈正相關(guān)關(guān)系，等級相關(guān)系數(shù)r<,s>及P值分別為(r<,s>=0.7794，P<0.01)，(r<,s>=0.6014，P<0.01)。 結(jié)論： 1 COX-2和HPV16-E6蛋白在宮頸癌組織中的陽性表達率明顯高于慢性宮頸炎組及正常宮頸組，表明COX-

14、2和HPV16-E6蛋白與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展及惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)。CIN及宮頸炎組織中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組，表明在宮頸癌變發(fā)生早期即有COX-2和HPV16-E6蛋白水平的升高，提示：COX-2和HPV16-E6蛋白表達上調(diào)是宮頸癌發(fā)病的早期事件，檢測二者在宮頸組織中的表達有助于早期診斷宮頸癌前病變及早期浸潤癌。 2 COX-2和HPV16-E6蛋白與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系：COX-2與宮頸癌發(fā)病年齡、病理類型

15、、分化程度分期、腫瘤直徑無關(guān)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或脈管浸潤及浸潤深度有關(guān)。HPV16-E6蛋白與宮頸癌發(fā)病年齡、病理類型、宮旁或脈管浸潤有關(guān)，而與組織分化程度、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑及浸潤深度無關(guān)。表明：COX-2在宮頸癌發(fā)生發(fā)展及演進整個過程均發(fā)揮作用，檢測COX-2還可作為反映宮頸癌惡性程度及侵襲轉(zhuǎn)移能力的指標(biāo)。高危型HPV16感染引起的宮頸癌多發(fā)生在年齡較大人群(≥45歲)，且與宮頸鱗癌的關(guān)系較其他病理類型更加密切。HPV1