金雀異黃酮誘導HepG2細胞葡萄糖醛酸轉移酶的表達.pdf

1、目的：金雀異黃酮(Genistein，Gs)是一種具有多種藥理學作用的植物雌激素；研究發(fā)現(xiàn)它能通過激活核受體而調節(jié)多種藥物代謝酶的表達。尿二苷葡萄糖醛酸轉移酶(UGT)是生物體內(nèi)最重要的Ⅱ相藥物代謝酶，它能代謝許多種內(nèi)外源性物質。本課題的研究目的是探討Gs對人肝癌HepG2細胞株UGT1A、UGT2B及其它們的同工型酶的誘導作用及其機制。 方法：將HepG2細胞分成6組，即空白組、陽性對照組及四個Gs濃度組(1-10μM)；分別

2、于加藥后12h、24h及36h收集細胞。提取總RNA用半定量RT-PCR分別檢測PPARα、UGT1A及其同工型UGT1A1和UGT1A9、UGT2B及其同工型UGT284mRNA的表達；提取微粒體蛋白用Western印跡檢測UGT1A蛋白表達。 結果：(1)在實驗劑量下，Gs在給藥后12-36h對UGT1A1及UGT2BmRNA僅有輕微的誘導作用，與空白對照組相比沒有發(fā)現(xiàn)顯著性差異。Gs在12h時對UGT1A及UGT1A9mR

3、NA的上調作用最明顯，與空白組的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；另外，此時UGT1AmRNA表達量與Gs劑量呈顯著正相關(r=0.781，P=0.01)。Gs在24h對PPARα及UGT284mRNA的誘導作用最顯著，差異具有統(tǒng)計學意義。此外，在12-36h期間，PPAR α及UGT284mRNA表達量與Gs劑量呈顯著正相關。(2)Gs在12-36h能上調UGT1A蛋白的表達，但在24h時作用最顯著，有統(tǒng)計學意義。(3)PPAR α

4、mRNA與UGT1A9mRNA表達量無相關性(P>0.05)，與UGT284mRNA量呈顯著正相關(r=0.568，P<0.01)。 結論：(1)1-10μM的Gs能誘導PPARα、UGT284、UGT1A及其同工型UGT1A9mRNA表達，并能增加UGT1A蛋白表達。(2)PPAR α可能在Gs對UGT284表達調節(jié)中的作用明顯，即Gs可能通過激活PPARα而上調UGT284的表達，而PPARα在Gs對UGT1A9表達調節(jié)中的