尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A7(UGT1A7)基因多態(tài)性與膀胱癌易感性的關(guān)系.pdf

1、【目的與背景】膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤。在全世界腫瘤發(fā)病統(tǒng)計數(shù)據(jù)中膀胱癌在泌尿系腫瘤中僅次于前列腺癌居第二位,而在我國,膀胱癌的發(fā)病率和死亡率均居首位。膀胱癌的發(fā)生是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果,環(huán)境因素中吸煙與膀胱癌的發(fā)生關(guān)系密切,是膀胱癌獨立的發(fā)病風(fēng)險。香煙中含有多種致癌物質(zhì),其中多環(huán)芳烴和芳香胺類是最重要的致癌物。但并非全部吸煙者均發(fā)生膀胱癌,提示可能存在個體遺傳易感性差異。研究表明,致癌物代謝酶基因多態(tài)性是決定個體遺傳

2、易感性的重要基礎(chǔ)。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)是人體內(nèi)重要的Ⅱ相代謝酶系,可催化含-OH、-SH、-COOH、-NH2等基團的一大類外源性毒物,其中也包括對雜環(huán)、多環(huán)碳氫化合物以及雜環(huán)胺類致癌物的解毒和滅活。體外實驗已證明UGT1A7基因第1外顯子的3處錯義突變編碼的UGT1A7酶對3-,7-,9-羥基苯并芘的代謝能力下降,后者是香煙中的強致癌物。因此推測其可能與吸煙所致膀胱癌的發(fā)生有相關(guān)性。UGT1A7基因多態(tài)性與消化道腫瘤、

3、肝癌、咽喉癌、肺癌的易感性有關(guān),但與膀胱癌的關(guān)系尚未見報道。因此,本研究目的是探討UGT1A7基因多態(tài)性聯(lián)合吸煙行為與膀胱癌易感性的關(guān)系。
　　【材料與方法】1.研究對象研究設(shè)計得到鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會認可,病例組和對照組均為2006年1月~2008年8月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科住院患者。病例組(208例)為組織病理學(xué)確診的膀胱癌患者;對照組(205例)為同期非腫瘤住院患者,均無膀胱癌和其它腫瘤病史。兩組所選對象均為河南省漢

4、族人群,兩組年齡、性別構(gòu)成均衡,具有可比性。2.流行病學(xué)調(diào)查所有研究對象均按照統(tǒng)一設(shè)計的流行病學(xué)問卷調(diào)查量表進行有關(guān)職業(yè)、環(huán)境、生活方式、吸煙史及腫瘤相關(guān)數(shù)據(jù)和一般情況調(diào)查。3.基因型檢測調(diào)查對象抽取外周靜脈血2~3ml,用“酚-氯仿”法提取基因組DNA;用應(yīng)用半巢式PCR(SN-PCR),等位基因特異性PCR(AS-PCR)基因檢測技術(shù)和限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性(RFLP)技術(shù),對UGT1A7的129AAT-AAG,131CGA-A

5、AA,208 TGG-CGG的基因突變位點進行基因檢測分析,根據(jù)凝膠電泳結(jié)果中目的基因片段出現(xiàn)的情況判斷各等位基因和基因型的分布。UGT1A7基因第1外顯子存在4處堿基突變:387T→G,391、392CG→AA和622T→C,分別導(dǎo)致Asn129Lys、Argl31Lys和Trp208Arg3處氨基酸密碼子的錯義突變。相應(yīng)的各多態(tài)等位基因型定義為:UGT1A7~*1即野生型(Asn129、Argl31、Trp208)、UGT1A7~*

6、2(Lysl29、Lys131、Trp208)、UGT1A7~*3(Lys129、Lysl31、Arg208)和UGT1A7~*4(Asnl29、Arg131、Arg208)。4.統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS14.0 for Windows統(tǒng)計軟件包,以χ~2檢驗檢測對照組中基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡,分析病例組和對照組中等位基因和基因型分布的差異以及基因型與環(huán)境因素的相互關(guān)系。以非條件Logistic回歸分析研究環(huán)境

7、危險因素與膀胱癌易感性之間的相關(guān)性。檢驗水平a=0.05,以比值比(OR)和95％的可信區(qū)間(Confidence Intervals,CI)表示相對危險度。
　　【結(jié)果】1 UGT1A7基因吻合度檢測將對照組基因型頻率進行基因吻合度檢測,結(jié)果表明對照組UGT1A7的基因型頻率符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),說明對照組樣本具有良好的代表性。2 UGT1A7基因型或等位基因分布與膀胱癌易感性的關(guān)系通過對UGT1

8、A7基因型在兩組間的分布比較發(fā)現(xiàn)膀胱癌組變異純合基因型的頻率(20.7％)高于對照組(12.2％),差異有統(tǒng)計學(xué)意義[P<0.05,OR=2.16(1.18-3.96)]。膀胱癌組攜帶~*1,~*2,~*3,~*4等位基因的頻率分別為52.9％、18.5％、27.9％、0.7％,對照組分別為60.7％、18.0％、20.5％、0.8％,其中膀胱癌組攜帶變異等位基因~*3的頻率(27.9％)高于對照組(20.5％),差異有統(tǒng)計學(xué)意義[P<

9、0.05,OR=1.56(95％CI:1.12-2.18)]。3吸煙行為與膀胱癌易感性的關(guān)系膀胱癌組吸煙者105例(49.5％),非吸煙者103例(50.5％)。對照組吸煙者65例(31.7％),非吸煙者140(68.3％)例。吸煙人群中膀胱癌的發(fā)病風(fēng)險顯著高于不吸煙人群[P<0.01,OR=2.20(95％CI:1.47-3.28)]。4 UGT1A7基因型聯(lián)合吸煙行為與膀胱癌易感性的關(guān)系根據(jù)是否吸煙對膀胱癌組和對照組進一步分層,吸煙

10、且基因型為變異雜合基因型[~*1/~*x(x=~*2,~*3,~*4)]或變異純合基因型[~*x/~*x(x=~2,~*3,~*4)]者與野生型相比,2組間有明顯差異,OR(95％CI)值分別為2.16(1.07-4.36),2.64(1.02-6.80)。不吸煙且基因型為變異雜合基因型或變異純合基因型者與野生型相比在2組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。表明該基因多態(tài)性與吸煙行為在膀胱癌的發(fā)生過程中存在交互作用。5 UGT1A7基因

11、型與膀胱癌病理分級、分期的關(guān)系在膀胱癌組中有完整病理分級、分期資料的有182例,在野生型的病例中G1級13例(26.0％)、G2+G3級37例(74.0％);變異雜合基因型[~*1/~*x(x=~*2,~*3,~*4)]的病例中G1級25例(36.1％)、G2+G3級71例(73.9％);變異純合基因型[~*x/~*x(x=~*2,~*3,~*4)]的病例中G1級4例(11.8％)、G2+G3級30例(88.2％),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P

12、>0.05)。在野生型病例中表淺腫瘤(Tis、Ta、T1期)35例(67.3％),肌層浸潤腫瘤(T2a、T2b、T3、T4)17例(32.7％);變異雜合基因型[~*1/~*x(x=~*2,~*3,~*4)]的病例中表淺腫瘤59例(62.8％),肌層浸潤腫瘤35例(37.2％);變異純合基因型(~*x/~*x(x=~*2,~*3,~*4))的病例中表淺腫瘤25例(69.4％),肌層浸潤腫瘤11例(30.6％)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0