葡萄糖腹透液對單層人腹膜間皮細胞通透性的影響.pdf

1、超濾衰竭是目前腹膜透析(PD)患者退出治療的最主要原因之一。大量研究證實，高濃度葡萄糖腹透液(PDS)的長期應用不但可造成的腹膜通透性升高，而且損傷后修復再生能力同樣受到抑制，這種反復的損傷和修復異常將引起腹膜高濾過狀態(tài)甚至細胞向間充質細胞轉分化(EMT)的改變，最終導致超濾衰竭的發(fā)生。因此，研究PDS中葡萄糖成分在HPMC的高通透性改變和修復受抑過程中是否起著關鍵作用，對于透析超濾衰竭和腹膜纖維化的防治具有重要意義。但目前具體機制尚不

2、明確。最新研究發(fā)現(xiàn)，間皮細胞單層融合狀態(tài)下的跨細胞電阻值(Transmesothelial electrical resistance，TER)是反映間皮細胞層通透性的靈敏指標，這一技術為我們研究葡萄糖PDS對HPMC通透性的影響的問題提供了新的思路和方法。 目的： 觀察不同濃度葡萄糖腹透液對單層HPMC增殖能力，通透性以及遷移修復能力的影響，研究葡萄糖成分是否是導致長期PD患者腹膜高通透性和超濾衰竭的重要因素，以探討超

3、濾衰竭和腹膜纖維化的發(fā)生發(fā)展機制。 方法： 體外培養(yǎng)HPMC，用不同濃度葡萄糖PDS(1.5％、2.5％、4.25％)分別與DMEM混合成1:1的實驗干預液，另設單純DMEM為對照組。作用各組細胞24小時后，四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法測定細胞增殖；采用雙池培養(yǎng)皿構建人腹膜間皮細胞體外通透性模型，實驗干預液分別作用于各實驗組細胞0、3、6、12、24小時，采用TER技術測定葡萄糖對單層HPMC通透性的影響；實驗干預液作

4、用于各實驗組24和48小時，采謂劃痕損傷實驗觀察葡萄糖對HPMC細胞修復再生能力的影響。 結果： 葡萄糖腹透液干預HPMC24小時后，與對照組比較均可明顯抑制HPMC的增殖(P<0.05)，且腹透液葡萄糖濃度越高，抑制越明顯。HPMC的TER值隨時間的延長而逐漸下降，且葡萄糖濃度越高，下降趨勢越明顯(P<0.005)。腹透液作用于各實驗組24小時后，HPMC遷移修復能力與對照組相比明顯受抑，且葡萄糖濃度越高，其抑制作用越