復(fù)方芍根口服液防治大鼠放射性食管炎的實驗研究.pdf

1、目的： 研究復(fù)方芍根口服液對放射性食管炎的預(yù)防和治療效果。通過研究復(fù)方芍根口服液對大鼠急性放射性食管炎免疫功能損傷的修復(fù)作用，食管組織中羥自由基(OH·)，一氧化氮(NO)及血清一氧化氮(NO)水平和過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性變化，食管組織中表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和P物質(zhì)表達(dá)盼變化，分析復(fù)方芍根口服液對放射性食管炎治療作用的機(jī)制。

2、 方法： 1 將1 28只Wistar大鼠隨機(jī)分為8組，分別為正常對照組(不做任何處理)，單純放射一組(放射后第7天處死)，單純放射二組(放射后第14天處死)，復(fù)方芍根口服液正常劑量預(yù)防組(從放射開始給藥)，復(fù)方芍根口服液大劑量預(yù)防組(從放射開始給藥)，復(fù)方芍根口服液正常劑量治療組(從放射后第7天給藥)，復(fù)方芍根口服液大劑量治療組(從放射后第7天給藥)，西藥治療對照組(從放射后第7天給藥)。 2 從大鼠的食管組織病

3、理學(xué)、細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)、每日飲食飲水量、體重等變化，觀察復(fù)方芍根口服液對大鼠放射性食管炎的預(yù)防和治療效果。 3采用流式細(xì)胞術(shù)檢測各實驗點大鼠外周血中CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>T細(xì)胞的絕對值與百分率，用血細(xì)胞儀檢測大鼠外周血白細(xì)胞計數(shù)及分類變化，用免疫濁度法檢測大鼠血清IgG及補體C3的含量。 4 96只Wistar大鼠隨機(jī)分為8組(分組同方法1)，在各實驗結(jié)束點，留取大鼠血清和全長食管，檢測大鼠食管組織

4、勻漿液中OH·、NO含量，CAT、GSH-PX活性及血清NO水平。 5 通過免疫組織化學(xué)方法檢測各實驗點大鼠食管組織EGF、TGFβ1、iNOS和SP的表達(dá)。 結(jié)果： 1 復(fù)方芍根口服液及西藥(對照)對食管的放射性病理損傷均有一定治療作用。中藥口服液正常劑量預(yù)防組大鼠的食管上皮細(xì)胞器大致恢復(fù)正常。中藥預(yù)防和治療組與單純放射二組相比，大鼠的飲食量飲水量均增加，尤以中藥大劑量預(yù)防組飲食飲水量增加明顯。西藥治療組與單純

5、放射二組相比飲食量略有下降。 2 輻射可導(dǎo)致放射性食管炎大鼠的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞百分率及絕對數(shù)、CD3<'+>、CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞絕對值、IgG及補體C3水平降低。與單純放射二組相比，中藥口服液各處理組可提高大鼠淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。大劑量預(yù)防用藥可明顯提高大鼠淋巴細(xì)胞計數(shù)，而西藥治療組大鼠的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞百分率及總數(shù)卻有所降低(P<0.05)。中藥大劑量預(yù)防及治療組，均可顯著提高大鼠外周血中CD3<'+>、

6、CD4<'+>和CD8<'+>T細(xì)胞的絕對值(P<0.001)。與單純放射二組相比，西藥治療組大鼠CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>T細(xì)胞的絕對值明顯降低(P<0.001)。與單純放射二組相比，中藥口服液大劑量預(yù)防治療可以提高大鼠血清補體C3的含量(P<0.05)，經(jīng)西藥治療后，血清IgG及補體C3水平明顯降低(P<0.01)。 3 大鼠經(jīng)43Gy<'60>Co-γ射線于食管局部單次照射后第14天，食管組織中OH·和

7、NO含量明顯上升(P<0.05)；CAT和GSH-PX活性水平也顯著增高(P<0.01)。經(jīng)復(fù)方芍根口服液治療后，食管組織中的OH·和NO含量與單純放射二組相比明顯下降(P<0.05)，尤以復(fù)方芍根口服液大劑量治療組下降明顯(P<0.01)；CAT和GSH-PX活性降低(P<0.05)。西藥治療組大鼠與單純放射二組相比，食管組織中的NO含量及CAT和GSH-Px活性下降(P<0.05)。各組大鼠血清中NO水平差異無顯著性(P>0.05)

8、。 4 經(jīng)43Gy<'60>Coy射線照射后2w時，大鼠食管組織中EGF和TGFβ1的表達(dá)高于正常大鼠食管組織(P<0.05)。復(fù)方芍根口服液正常劑量和大劑量預(yù)防組大鼠的食管組織中EGF和TGFβ1的表達(dá)水平均高于單純放射二組(P<0.05)，與正常組大鼠相比顯著增高(P<0.01)。復(fù)方芍根口服液治療組大鼠食管組織中EGF的表達(dá)水平與單純放射二組相比無顯著性(P>0.05)，但高于正常大鼠食管組織(P<0.05)。經(jīng)復(fù)方芍根口

9、服液正常劑量治療后，食管組織中TGFβ1的表達(dá)水平與正常組相比已無明顯差異(P>0.05)，但大劑量治療組仍高于單純放射二組(P<0.05)。經(jīng)西藥治療后，大鼠食管組織中EGF表達(dá)高于單純放射二組(P<0.05)，顯著高于正常組(P<0.01)；TGFβ1的表達(dá)高于正常對照組(P<0.05)，但與單純放射二組無明顯差異(P>0.05)。 5 單純放射一、二組大鼠食管上皮下層iNOS表達(dá)明顯升高。與單純放射二組相比，復(fù)方芍根口服液

10、預(yù)防組、治療組和西藥治療組大鼠食管上皮下層iNOS的表達(dá)均可明顯降低(P<0.01)。 6 實驗大鼠食管經(jīng)43Gy<'60>Coy射線照射后7d和14d，食管粘膜組織內(nèi)P物質(zhì)的表達(dá)明顯高于正常組(P<0.01)。經(jīng)復(fù)方芍根口服液預(yù)防性治療后，與單純放射二組相比大鼠食管組織內(nèi)P物質(zhì)表達(dá)明顯下降(P<0.01)，并且與正常組無明顯差異(P>0.05)。復(fù)方芍根口服液正常劑量治療組和大劑量治療組食管組織中，P物質(zhì)的表達(dá)水平明顯低于單純放射二組

11、(P<0.01)，但未恢復(fù)正常(P<0.05)。西藥治療組大鼠食管組織中P物質(zhì)表達(dá)水平略低于單純放射二組(P<0．05)，與正常組有明顯差異(P<0.01)。 結(jié)論： 1 復(fù)方芍根中藥口服液具有預(yù)防與治療放射性食管炎的作用。 2 復(fù)方芍根口服液具有修復(fù)放射性食管炎大鼠的細(xì)胞免疫及體液免疫功能。 3 復(fù)方芍根中藥口服液有助于降低放射性食管炎大鼠食管組織中OH·和NO水平，進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)食管的作用。相應(yīng)的氧化酶

12、CAT和GSH-PX活性降低。 4 復(fù)方芍根口服液可能通過提高細(xì)胞生長因子-EGF和TGFβ1的表達(dá)水平發(fā)揮對食管炎的治療作用，而在組織恢復(fù)正常后快速回落，從而縮短大鼠放射性食管炎傷口愈合的時程。 5 復(fù)方芍根中藥口服液可能是通過降低大鼠食管組織中的誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)來抑制放射性食管炎大鼠食管組織中NO的過量合成，進(jìn)而發(fā)揮促進(jìn)放射性食管炎傷口愈合的作用。 6 復(fù)方芍根口服液可能是通過縮短P物質(zhì)由高峰至恢復(fù)