干擾素-γ及白細(xì)胞介素-4在膽脂瘤型中耳炎的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：膽脂瘤型中耳炎是一種以上皮細(xì)胞增殖、角化、脫落、堆積和骨質(zhì)破壞為特征的慢性中耳炎性疾病。它常破壞聽骨鏈、面神經(jīng)管及中耳腔周圍骨質(zhì)，引起嚴(yán)重聽力下降及各種顱內(nèi)外并發(fā)癥。其發(fā)病的確切機(jī)制至今仍不十分清楚。已證實(shí)免疫因素在膽脂瘤型中耳炎的發(fā)病機(jī)制中起到重要作用。在膽脂瘤標(biāo)本中我們可以觀察到大量免疫細(xì)胞如T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞等。有學(xué)者認(rèn)為，膽脂瘤上皮的異常增殖行為及其周圍骨質(zhì)的破壞，與這些浸潤的免疫細(xì)胞及其釋放的多種不

2、同細(xì)胞因子有密切關(guān)系。Th1/Th2免疫系統(tǒng)平衡及失調(diào)一直是學(xué)者們研究的熱點(diǎn)。Th1/Th2平衡失調(diào)與機(jī)體多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。由于尚未發(fā)現(xiàn)明確的表面標(biāo)志，目前區(qū)分Th1/ Th2細(xì)胞亞群仍根據(jù)其所產(chǎn)生的細(xì)胞因子及其生物效應(yīng)來確定。在某種意義上，可以把IFN-γ和IL-4分別作為Th1和Th2細(xì)胞的標(biāo)志性細(xì)胞因子，通過檢測這兩種細(xì)胞因子的含量可以間接反映兩種細(xì)胞亞群的功能與狀態(tài)。IFN-γ做為一種重要的細(xì)胞因子，它可以調(diào)控各種免疫

3、細(xì)胞（T細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞、肥大細(xì)胞等）及細(xì)胞因子（IL-1、IL-6、TNF-α等）的生成，在機(jī)體免疫反應(yīng)中起到關(guān)鍵作用。IFN-γ既可以與角質(zhì)細(xì)胞（KC）相互作用，促進(jìn)上皮增生；又可以調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的生成，影響骨質(zhì)吸收。有報(bào)道IFN-γ受體在中耳膽脂瘤基底層中高表達(dá)，但I(xiàn)FN-γ與膽脂瘤型中耳炎發(fā)病機(jī)制的研究，國內(nèi)外迄今未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用連續(xù)切片免疫組化及流式細(xì)胞分析技術(shù)分別檢測中耳膽脂瘤手術(shù)切除標(biāo)本及中耳膽脂瘤患者外周血中IFN-

4、γ及IL-4的表達(dá)情況，間接分析了Th1/Th2的平衡漂移情況，探討中耳膽脂瘤患者局部及全身免疫情況的改變，加深和豐富了我們對膽脂瘤型中耳炎發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為以后應(yīng)用免疫制劑治療該病提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科2007年7月-2008年5月住院中耳膽脂瘤患者30例作為實(shí)驗(yàn)組，采集手術(shù)切除標(biāo)本30份，其中男性14例，女性16例；年齡11-56歲，中位數(shù)年齡37歲。標(biāo)本均

5、常規(guī)行HE染色，確診為中耳膽脂瘤。同時(shí)選取行鼓膜修補(bǔ)術(shù)病人的外耳道皮膚20例做為對照組。所有受檢者實(shí)驗(yàn)前2周內(nèi)均無全身或局部使用糖皮質(zhì)激素及免疫制劑。所有標(biāo)本經(jīng)過處理（固定、包埋、切片等）后，用免疫組化法檢測標(biāo)本中IFN-γ和IL-4的表達(dá)情況。⑵抽取上述實(shí)驗(yàn)組病人空腹外周血約1ml于肝素抗凝管中，搖勻；并選取同期我院健康體檢者20例做為正常對照組，其中男性12例，女性8例；年齡20-62歲，中位數(shù)年齡31歲。所有血液標(biāo)本經(jīng)過處理（固定

6、、染色等）后，用流式細(xì)胞分析儀檢測外周血T細(xì)胞中IFN-γ和IL-4的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：①中耳膽脂瘤上皮下組織的基底層中聚集了大量的炎性細(xì)胞。②中耳膽脂瘤組織中IFN-γ的表達(dá)高于正常對照組，其差異有顯著性意義（p<0.05）。③中耳膽脂瘤組織中IL-4的表達(dá)與正常對照組的差異無顯著性意義（P>0.05）。④膽脂瘤型中耳炎患者外周血CD3+ IFN-γ+T的百分率較正常對照組明顯升高，兩組差異有顯著性意義（p<0.05）；

7、CD3+IL-4+T細(xì)胞的百分率與正常對照組相比，差異無顯著性意義（p>0.05）；CD3+ IFN-γ+T/ CD3+IL-4+T的比值較正常對照組顯著增大，差異有顯著性意義（p<0.05）。
　　 結(jié)論：⑴在中耳膽脂瘤組織中，與對照組外耳道皮膚相比，IFN-γ大部分呈陽性表達(dá)，部分呈強(qiáng)陽性表達(dá)，主要位于膽脂瘤上皮下的基底層中，因此，我們推測IFN-γ在中耳膽脂瘤的發(fā)病中可能起到關(guān)鍵作用。⑵膽脂瘤標(biāo)本中IFN-γ表達(dá)較高，IL