覆盆子補(bǔ)腎活性成分研究.pdf

1、華東覆盆子(Rubus chingii Hu)，又名掌葉覆盆子，為薔薇科懸鉤子屬植物，分布于浙江、江蘇、安徽、江西、福建、廣西，其近成熟果實(shí)入藥稱為覆盆子，收載于《中國(guó)藥典》2005年版一部，具有益腎，固精，縮尿之功效，用于腎虛遺尿，小便頻數(shù)，陽(yáng)痿早泄，遺精，滑精。 研究背景：覆盆子作為傳統(tǒng)藥用植物，在我國(guó)已經(jīng)有幾千年的使用歷史，療效顯著。但對(duì)于它的現(xiàn)代研究并不充分，因此，對(duì)覆盆子的補(bǔ)腎化學(xué)成分進(jìn)行研究，對(duì)于建立覆盆子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，

2、開(kāi)發(fā)利用覆盆子資源具有非常重要的意義。 研究目的：通過(guò)對(duì)華東覆盆子藥理活性研究，明確其補(bǔ)腎活性作用以及有效部位，進(jìn)一步對(duì)有效部位進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分研究。為覆盆子資源的開(kāi)發(fā)利用及補(bǔ)腎新藥的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。 研究?jī)?nèi)容和方法： 樣品的來(lái)源：華東覆盆子采自浙江省。 1、通過(guò)腹腔注射氫化可的松誘導(dǎo)小鼠腎陽(yáng)虛，以小鼠的體重，血清睪酮濃度，以及腎臟和睪丸病理學(xué)改變?yōu)橹笜?biāo)，考察了不同劑量覆盆子提取物對(duì)腎陽(yáng)虛小鼠的保護(hù)作用，

3、對(duì)覆盆子提取物進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)。 2、通過(guò)比較提取物的石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位、水部位的低、中、高三個(gè)劑量對(duì)腎陽(yáng)虛小鼠體重下降，血清睪酮濃度降低，腎臟細(xì)胞縮小，胞漿減少，睪丸各級(jí)精母細(xì)胞數(shù)量減少的改善效果，確定覆盆子提取物對(duì)腎陽(yáng)虛小鼠保護(hù)作用的活性部位。 3、對(duì)覆盆子提取物的活性部位進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分研究：采用溶劑萃取，硅膠層析、凝膠柱層析、重結(jié)晶等方法分離純化獲得單體化合物，應(yīng)用理化常數(shù)測(cè)定和光譜

4、學(xué)方法(mp、IR、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC、COSY、NOSEY、EI-MS、ESI-MS)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。 結(jié)果和結(jié)論： 1、小鼠注射氫化可的松后，與空白組比較，體重明顯下降，血清睪酮濃度明顯降低，腎臟細(xì)胞縮小，胞漿減少，睪丸中各級(jí)精母細(xì)胞數(shù)明顯減少。與模型組相比，給予陽(yáng)性藥物甲睪酮片、金匱腎氣丸和覆盆子提取物均能明顯改善氫化可的松誘導(dǎo)的腎陽(yáng)虛小鼠體重下降，血清睪酮濃度降低，腎臟及睪丸的病理

5、學(xué)改變。與模型組相比，中劑量(6g/kg生藥)，高劑量(18g/kg生藥)，陽(yáng)性藥物組均具有顯著性差異(P＜0.05)。且高劑量組優(yōu)于中劑量組。表明覆盆子提取物中、高劑量對(duì)小鼠腎陽(yáng)虛具有保護(hù)作用。 2、給予氫化可的松誘導(dǎo)的腎陽(yáng)虛小鼠低、中、高劑量(2g/kg、6g/kg、18g/kg生藥)的覆盆子提取物的石油醚萃取部位、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位、水部位，各組均能一定程度改善氫化可的松誘導(dǎo)的腎陽(yáng)虛小鼠的各指標(biāo)，與模型組相比

6、，正丁醇萃取部位的中、高劑量具有顯著性差異(P＜0.05)，表明覆盆子對(duì)于腎陽(yáng)虛的保護(hù)作用活性部位為正丁醇部位。 3、從覆盆子果實(shí)提取物的正丁醇部位分離得到5個(gè)化合物，鑒定其中4個(gè)，分別為4’，5，7-三羥基黃酮醇-3-O-β-D(6”-對(duì)羥基桂皮酰基)-葡萄糖苷(Y-6)、山奈酚(Y-9)、覆盆子素(Y-11)、槲皮素(Y-15)，其中Y-11為新化合物，作者命名為覆盆子素。 4、從覆盆子的二氯甲烷部位分離得到11個(gè)化

7、合物，鑒定其中9個(gè)，分別為二十六烷醇(Y-1)、β-谷甾醇(Y-2)、4-羥基-3-甲氧基苯甲酸(Y-3)、對(duì)羥基苯甲酸醛(Y-4)、齊墩果酸(Y-5)、Stigmast-5-en-3-ol，oleate(Y-7)、H-2-indenone，2，4，5，6，7，7a-hexahydro-3-(1-methylethyl)-7a-methyl(Y-12)、4-羥基-3甲氧基苯甲酸(Y-13)、liballinol(Y-14)。除β-谷甾醇