熱休克蛋白90在妊娠期高血壓疾病患者血清和胎盤(pán)中的表達(dá)研究.pdf

1、目的：妊娠期高血壓疾病(hypertensive disorders complicating pregnancy， HDCP)是妊娠期的特有疾病，在我國(guó)平均發(fā)病率為9.40％，嚴(yán)重威脅母嬰的生命安全，但其確切病因及發(fā)病機(jī)制至今未能闡明，一直是婦產(chǎn)科領(lǐng)域的重要研究課題。熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)90是熱休克蛋白家族中重要的成員之一，是存在于真核生物和細(xì)菌中的一種基本的重要的分子伴侶，作為特異分子伴侶的HS

2、P90參與多種信號(hào)途徑中的激酶、核受體和p53等轉(zhuǎn)錄因子活性的調(diào)節(jié)，在細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育、分化、蛋白質(zhì)合成、折疊運(yùn)輸和分解、細(xì)胞骨架的功能、膜功能以及應(yīng)激條件下對(duì)細(xì)胞的保護(hù)等生理代謝中起著重要的生物學(xué)作用。但目前尚無(wú)HSP90在妊娠期高血壓疾病中的研究報(bào)道。本課題旨在探討熱休克蛋白90與妊娠期高血壓疾病發(fā)生的關(guān)系，以及為病情嚴(yán)重程度的判定奠定基礎(chǔ)，探索妊娠期高血壓疾病的
　　，以便為更好的防治本病，降低圍產(chǎn)期母兒死亡率。
　　

3、 方法：資料來(lái)源：選自在河北省石家莊市第四醫(yī)院2009年10月至2010年10月住院分娩的產(chǎn)婦共150例，所有病例均為初次分娩且為剖宮產(chǎn)。按照第七版《婦產(chǎn)科學(xué)》妊娠期高血壓疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)分為四組：第1組正常孕婦30例；第2組妊娠期高血壓孕婦40例；第3組輕度子癇前期孕婦40例；第4組重度子癇前期40例。四組之間年齡、孕周、體重、孕產(chǎn)次均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。所有研究對(duì)象晨起空腹采肘靜脈血2ml，分娩時(shí)采臍靜脈血2ml，離心10m后取上清液，-8

4、0℃保存，待行ELISA檢測(cè)HSP90含量。取行剖宮產(chǎn)孕婦于胎盤(pán)娩出后即刻，避開(kāi)壞死和鈣化區(qū)域，取胎盤(pán)組織塊大小為1×1×1cm3，立即將組織置入-196℃液氮罐內(nèi)冷凍保存，準(zhǔn)備進(jìn)行定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-timePCR)和Westernblot檢測(cè)HSP90基因和蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.一般情況妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組患者既往均無(wú)高血壓、心臟病、糖尿病、肝腎疾病、血栓性疾病、自身免

5、疫性疾病。此次妊娠不合并其他疾病。正常妊娠組孕婦BP＜140/90mmHg，尿蛋白(-)，無(wú)妊娠合并癥及并發(fā)癥，既往無(wú)自身免疫性疾病和反復(fù)流產(chǎn)、死胎病史。四組孕婦的一般情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 2.在正常妊娠組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組靜脈血中HSP90水平分別為0.63±0.35，0.91±0.38，1.35±0.42，1.79±0.43(ng/ml)，均較正常組明顯升高，且均隨

6、著病情的加重逐漸升高(p＜0.01)。而且妊娠期高血壓組與正常妊娠組、輕度子癇前期組與妊娠期高血壓組、重度子癇前期組與輕度子癇前期組比較均有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　 3.正常組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組臍帶血中HSP90水平分別為0.21±0.07，0.23±0.12，0.27±0.09，0.44±0.15(ng/ml)，可以看出，四組中除妊娠期高血壓組和輕度子癇前期組之間無(wú)明顯差異外（P＞

7、0.05），妊娠期高血壓組與正常妊娠組，重度子癇前期組與輕度子癇前期組兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），且重度子癇前期組與其它三組之間有極顯著差異(P＜0.01)．
　　 4.Western blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，HSP90在妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組胎盤(pán)中的蛋白和基因表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組，且呈現(xiàn)出逐漸加強(qiáng)的趨勢(shì)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　 5.RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，HSP9

8、0在妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組胎盤(pán)中的蛋白和基因表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組，且呈現(xiàn)出逐漸加強(qiáng)的趨勢(shì)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。
　　 6.直線相關(guān)分析：HSP90在外周血、臍帶血及胎盤(pán)中的表達(dá)與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（P＜0.01）。
　　 結(jié)論：HSP90的升高可能與妊娠期高血壓疾病的發(fā)生和發(fā)展有非常密切的關(guān)系，可以通過(guò)檢測(cè)外周血中HSP90的水平判斷和預(yù)測(cè)病情的嚴(yán)重程度。通過(guò)監(jiān)測(cè)臍血和胎盤(pán)組織中HSP