中藥熏洗促進大鼠失神經(jīng)支配骨骼肌損傷修復(fù)的實驗研究.pdf

1、目的：研究熏洗一號方促進失神經(jīng)支配骨骼肌損傷修復(fù)的機理． 方法 120只雄性SD大鼠，隨機取90只大鼠造模成功后，隨機分為熏洗一號方組、丹參組和模型組，剩余30只設(shè)為空白對照組，不做處理。各組實驗動物分別在術(shù)后7天、14天和2l天處死，股直肌肌腹組織塊取材，常規(guī)HE染色，分別觀察失神經(jīng)支配后骨骼肌結(jié)構(gòu)，乙酰膽堿酯酶活性，NGF、bFGF免疫組織化學(xué)染色和骨骼肌勻漿液Na+-K+-ATP酶改變。 結(jié)果： 1.HE染

2、色結(jié)果：術(shù)后7天：失神經(jīng)早期骨骼肌中絕大多數(shù)肌絲肌節(jié)排列尚規(guī)則，可見到著色變淺。熏洗一號方組，肌纖維未見明顯改變，部分肌纖維充血或壞死，但形態(tài)完整，有血管內(nèi)皮充血。丹參組肌纖維水腫，肌纖維排列紊亂。術(shù)后14天：熏洗一號方組，肌纖維周圍無明顯增生的膠原纖維。丹參組肌纖維壞死或變性。模型組肌纖維增生顯著，深入肌梭，代替肌肉組織，肌纖維排列紊亂。術(shù)后21天：熏洗一號方組，肌纖維排列尚整齊，極少有膠原纖維組織長入肌組織．丹參組肌細(xì)胞皺縮，纖維組

3、織增生明顯。模型組肌絲排列明顯紊亂，大量纖維組織增生。 2.乙酰膽堿酯酶活性：術(shù)后7天：各組乙酰膽堿酯酶活性較弱，丹參組和模型組與空白對照組相比(P<0.05)，熏洗一號方組與空白組相比(P>0.05)．術(shù)后14天：熏洗一號方組乙酰膽堿酯酶活性增強，但與空白組相比(P>0.05)，丹參組分別與模型組和空白對照組相比(P<0.01)。術(shù)后21天：熏洗一號方組乙酰膽堿酯酶活性強，接近于正常，染色均勻，運動終板結(jié)構(gòu)規(guī)則，呈橢圓形或卵圓

4、形花紋狀結(jié)構(gòu)，與空白組相比(P>0.05)；模型組和丹參組乙酰膽堿酯酶活性弱，與空白對照組相比(P<0.01)。 3.免疫組織化學(xué)染色觀察： (1)NGF表達：術(shù)后7天：熏洗一號方組，肌梭梭內(nèi)纖維肌細(xì)胞染色陽性，成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞染色較弱．丹參組肌梭肌細(xì)胞染色弱陽性．模型組肌梭變小，未見明顯染色。術(shù)后14天：熏洗一號方組，增生的膠原纖維染色陽性，血管內(nèi)皮細(xì)胞染色陽性，肌梭未見明顯染色。丹參組丹參組成纖維細(xì)胞染色陽性

5、，模型組肌梭萎縮，肌細(xì)胞染色陰性。術(shù)后21天：熏洗一號方組，增生的膠原纖維組織染色弱陽性。丹參組纖維組織未見染色。 (2)bFGF表達：術(shù)后7天：熏洗一號方組肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞染色陽性。丹參組成纖維細(xì)胞染色陽性。模型組成纖維細(xì)胞染色陽。術(shù)后14天：熏洗一號方組骨骼肌基底膜染色強陽性，成纖維細(xì)胞染色陽性，肌梭內(nèi)有少量肌細(xì)胞染色陽性。丹參組核肌梭內(nèi)成纖維細(xì)胞染色陽性．模型組肌梭內(nèi)細(xì)胞染色很淺。術(shù)后21天：熏洗一號方組肌梭肌細(xì)胞染色陽

6、性，神經(jīng)末梢處成纖維細(xì)胞染色強陽性．丹參組血管內(nèi)皮細(xì)胞有散在陽性細(xì)胞。模型組未見染色，肌纖維邊緣不規(guī)則相對大于正常。 4.骨骼肌勻漿液Na+-K-ATP結(jié)果：術(shù)后7天各組Na+-K+-ATP酶組間比較沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。術(shù)后14天熏洗一號方組-9空白對照組對比(P<0.05)．術(shù)后21天，熏洗一號方組-9空白對照組對比(P<0.01)，且熏洗一號方組Na+-K+-ArP酶含量最高。 結(jié)論： 1.失神經(jīng)