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1、目的:為了優(yōu)化中藥膚螨滅的提取工藝,進(jìn)一步明確其對(duì)兔疥螨病的療效為今后應(yīng)用和推廣提供試驗(yàn)參考。
方法:1.①選用L9(34)表進(jìn)行正交試驗(yàn),以提取物的離體殺螨活性作為確定最佳提取工藝的衡量指標(biāo);②觀察和記錄兔疥螨用膚螨滅、伊維菌素和蒸餾水后的死亡情況,評(píng)價(jià)其殺螨效果;③分觀察和記錄兔疥螨分別用12.5、6.25、3.125mg/mL膚螨滅后的死亡情況,計(jì)算各濃度的LT50;④將膚螨滅稀釋成10個(gè)濃度(25、12.5~0.049
2、mg/mL,r=2)進(jìn)行離體殺螨試驗(yàn),計(jì)算24h的LD50。2.取40只患疥螨病家兔分為五組:Ⅰ組蒸餾水組、Ⅱ組伊維菌素組,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別為12.5、6.25和3.125mg/mL的膚螨滅組,觀察各組的療效情況。3.取36只患疥螨病家兔分為三組:Ⅰ組蒸餾水組、Ⅱ組伊維菌素組和Ⅲ組膚螨滅組,另取12只健康家兔作為Ⅳ組,測(cè)定用藥前后患部組織的IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、EGF、b-FGF、VEGF和TGF-β含量。
3、 結(jié)果:1.①乙醇濃度80%,料液比1∶10,提取3次,每次提取2h殺螨效果最佳;②25mg/mL的膚螨滅96 min能殺滅全部受試螨蟲,略優(yōu)于3mg/mL的伊維菌素(144min)。③12.5mg/mL、6.25mg/mL、3.125mg/mL的膚螨滅對(duì)兔疥螨的LT50分別0.98h、3.89h、5.21h。④膚螨滅對(duì)兔疥螨24h的LC50為0.25mg/mL。2.膚螨滅對(duì)兔疥螨的療效:①用藥7d,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的癥狀評(píng)分顯著低于
4、Ⅰ組(P<0.01);用藥14d,Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組顯著低于Ⅰ、Ⅲ組(P<0.01);用藥28d,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組顯著低于Ⅰ組(P<0.01)。②從第7d開(kāi)始,Ⅰ組的體重增長(zhǎng)率均顯著低于其他各組(P<0.01);至28d,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的體重分別增加-0.65kg、0.23kg、0.06kg、0.24kg、0.18kg。③用藥前,各組患部皮膚織表皮角質(zhì)層增厚,皮下有嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)性。與Ⅰ組比較,Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組用藥7、14d時(shí)
5、,炎性細(xì)胞減少,角質(zhì)層變薄;Ⅲ組皮下還有中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。第28 d,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組組織結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常,而Ⅰ組仍然角質(zhì)層增厚,棘細(xì)胞層水泡變性,真皮層有大量嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。3.治療前,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的IL-10、TNF-α、EGF、b-FGF、VEGF和TGF-β顯著低于Ⅳ組(P<0.05),IL-6顯著高于Ⅳ組(P<0.01)。用藥后,Ⅰ組的IL-6、IL-10、EGF、VEGF和TGF-β顯著低于Ⅳ組(P<0.01),
6、IL-8、TNF-α和b-FGF高于Ⅳ組;Ⅱ組的IL-6、IL-10、EGF、VEGF和TGF-β顯著高于Ⅰ組(P<0.01);Ⅲ組的IL-6、IL-10、EGF、VEGF和TGF-β顯著高于Ⅰ組(P<0.01)。
結(jié)論:1.乙醇濃度80%,料液比1∶10,提取3次,每次提取2h的膚螨滅殺螨效果最佳。2.膚螨滅對(duì)兔疥螨的殺螨活性較強(qiáng),25mg/mL的膚螨滅殺螨活性與3mg/mL伊維菌素相當(dāng),對(duì)兔疥螨24h的LC50為0.25m
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