耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的SCCmec分型及同源性研究.pdf

1、目的：對(duì)甘肅省人民醫(yī)院下呼吸道標(biāo)本分離的MRSA（耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌）的耐藥譜特征、SCCmec分子生物學(xué)分型及同源性進(jìn)行研究，以了解致下呼吸道感染的MRSA的生物學(xué)特點(diǎn)，同時(shí)對(duì)其qacA/B(耐消毒劑基因)、PVL(殺白細(xì)胞毒素基因)的攜帶情況進(jìn)行研究，為臨床防治及抗感染治療提供理論依據(jù)。
　　方法：以甘肅省人民醫(yī)院2012年7月至2013年3月從臨床分離的69株MRSA菌株為研究對(duì)象,用頭孢西定紙片擴(kuò)散法對(duì)MRSA菌株

2、進(jìn)行初步篩選；應(yīng)用PBP2a蛋白膠乳凝集試劑法對(duì)MRSA進(jìn)行確認(rèn)；按2013年CLSI規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)用K-B法檢測(cè)MRSA菌株對(duì)19種常用藥物的耐藥性，利用WHONET5.6軟件對(duì)耐藥性結(jié)果進(jìn)行分析；應(yīng)用PCR技術(shù)、瓊脂糖凝膠凝膠電泳擴(kuò)增并檢測(cè)mecA、femA基因的攜帶情況；應(yīng)用PCR技術(shù)、瓊脂膠凝膠電泳對(duì)分離的MRSA菌株進(jìn)行SCCmec分型；應(yīng)用RAPD（隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA）技術(shù)對(duì)MRSA菌株進(jìn)行同源性分析；應(yīng)用PCR技術(shù)、瓊脂糖凝

3、膠電泳對(duì)MRSA菌株的qacA/B（耐消毒劑基因）、PVL（殺白細(xì)胞毒素基因）攜帶情況進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：從臨床下呼吸道標(biāo)本中分離的MRSA對(duì)青霉素和苯唑西林和頭孢西丁、頭孢噻肟均耐藥，對(duì)四環(huán)素、復(fù)方新諾明藥物的耐藥率較高，分別達(dá)到了66.67％、88.41％，而其他藥物的耐藥率均在40％以下，未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素的MRSA菌株。69株MRSA實(shí)驗(yàn)菌株P(guān)BP2a蛋白實(shí)驗(yàn)均為陽(yáng)性；實(shí)驗(yàn)菌株的mecA、femA基因檢測(cè)均為陽(yáng)性，攜帶率1

4、00％，與PBP2a蛋白實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。69株MRSA菌株SCCmec分型檢測(cè)均為ccrAB3型；經(jīng)RAPD技術(shù)將實(shí)驗(yàn)菌株共分為5個(gè)克隆株，其中有6株未能進(jìn)行分型；69株MRSA菌株中共有5株P(guān)VL基因陽(yáng)性，攜帶率7.25％；實(shí)驗(yàn)菌株的qacA/B基因檢測(cè)全部為陽(yáng)性，攜帶率100％。
　　結(jié)論：臨床下呼吸道標(biāo)本分離的69株MRSA菌株以呼吸科為主，絕大多數(shù)為住院患者，以呼吸道感染患者為主。MRSA感染已成為了多重耐藥趨勢(shì)，分離的