燒傷病房耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動(dòng)桿菌快速診斷及菌株同源性研究.pdf

1、本文對(duì)燒傷病房耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動(dòng)桿菌快速診斷及菌株同源性進(jìn)行了研究。本研究分為三個(gè)部分：
　　第一部分：三種檢測(cè)方法檢測(cè)燒傷病人耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的比較。
　　目的：對(duì)比細(xì)菌培養(yǎng)法、聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)、多重聚合酶鏈(multiplex PCR)反應(yīng)快速檢測(cè)燒傷病人傷口分泌物及痰液標(biāo)本中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin

2、-Resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和鮑曼不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii,A.baumannii)的檢出率和確診時(shí)間,為燒傷治療中抗菌藥物的使用提供分子生物學(xué)依據(jù),并為臨床實(shí)驗(yàn)室提供方便快捷的檢測(cè)方法。
　　方法：對(duì)蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院燒傷科采集的燒傷病人不同部位的標(biāo)本共128例(2013年01月~2013年12月),其中創(chuàng)面分泌物100例,痰液28例,采用細(xì)菌培養(yǎng)

3、法、普通PCR和多重PCR三種方法對(duì)128例標(biāo)本分別進(jìn)行檢測(cè),比較三種方法對(duì)MRSA和A.baumannii的檢出率和確診時(shí)間。
　　結(jié)果：128例標(biāo)本中,細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)MRSA和A.baumannii分離陽(yáng)性檢出率分別為45.3％和30.5％,確診時(shí)間均為72h;普通PCR和多重PCR陽(yáng)性檢出率與細(xì)菌培養(yǎng)法一致,亦為45.3％和30.5％,確診時(shí)間均為6h,但多重PCR法的檢測(cè)效率高于普通PCR法,可以同時(shí)檢測(cè)MRSA和A.bau

4、mannii菌株。
　　結(jié)論：與細(xì)菌培養(yǎng)法比較,普通PCR和多重PCR對(duì)MRSA和A.baumannii的檢出率并無(wú)差異,但在確診時(shí)間上,普通PCR和多重PCR所花費(fèi)的時(shí)間大大縮短,尤其是多重PCR法可在6h內(nèi)同時(shí)鑒別診斷出MRSA和A.baumannii,在有效節(jié)省人力、財(cái)力的同時(shí),為燒傷病人的治療提供有效分子生物學(xué)依據(jù),防止了抗生素的濫用和耐藥菌株的流行,減輕了病人的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
　　第二部分：多重PCR在燒傷病房周

5、圍環(huán)境中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的檢測(cè)應(yīng)用。
　　目的：利用多重PCR檢測(cè)燒傷病房周?chē)h(huán)境中的MRSA和A.baumannii,分析燒傷病房周?chē)h(huán)境中MRSA和A.baumannii檢出情況,探尋MRSA和A.baumannii院內(nèi)感染的途徑,指導(dǎo)燒傷病房采取積極有效的措施,阻斷病原體傳播途徑,預(yù)防并減少燒傷病房?jī)?nèi)MRSA和A.baumannii的爆發(fā)流行。
　　方法：采用多重PCR檢測(cè)燒傷病房醫(yī)護(hù)人員手、空氣

6、中及床單元MRSA和A.baumannii感染情況。
　　結(jié)果：⑴醫(yī)護(hù)人員的手:在給病人操作前和操作后采集樣本中未檢測(cè)到MRSA和A.baumannii。⑵燒傷病房空氣采樣結(jié)果:有MRSA或A.baumannii感染病人的4個(gè)病房?jī)?nèi)檢測(cè)出空氣中有MRSA或A.baumannii,1間有MRSA感染病人的病房?jī)?nèi)未檢測(cè)出MRSA,無(wú)MRSA和A.baumannii感染病人的病房空氣中未檢測(cè)出MRSA和A.baumannii。⑶燒傷病房

7、床單元:有MRSA或A.baumannii感染病人的8張床墊檢測(cè)出有MRSA或A.baumannii,1張有MRSA感染病人的床墊未檢測(cè)出MRSA,3張無(wú)MRSA和A.baumannii感染的床墊中未檢測(cè)出MRSA和A.baumannii。
　　結(jié)論：從有MRSA和A.baumannii感染病人的燒傷病房周?chē)h(huán)境(空氣和床單元)中檢測(cè)出MRSA和A.baumannii,說(shuō)明患者的感染與周?chē)h(huán)境的清潔消毒程度密切相關(guān),提示燒傷病房周

8、圍環(huán)境中的細(xì)菌可以傳播到病人傷口,同時(shí)病人傷口的細(xì)菌也可以擴(kuò)散到空氣中,直接導(dǎo)致感染爆發(fā)和流行的發(fā)生,所以加強(qiáng)燒傷病房周?chē)h(huán)境衛(wèi)生工作,嚴(yán)格做好空氣消毒以及定期監(jiān)測(cè)燒傷病房周?chē)h(huán)境等工作對(duì)預(yù)防MRSA和A.baumannii的爆發(fā)流行具有重要意義。
　　第三部分：燒傷科病房中病人及周?chē)h(huán)境中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和鮑曼不動(dòng)桿菌菌株同源性分析。
　　目的：采用ERIC(enterobacterial repetitive i

9、ntergenic consensus)-PCR方法對(duì)采集的燒傷病房病人創(chuàng)面、痰液以及周?chē)h(huán)境中MRSA和A.baumannii陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行同源性分析,為院感采取合適的方法控制感染爆發(fā)流行提供生物學(xué)依據(jù)。
　　方法：采用ERIC-PCR對(duì)燒傷病房分離培養(yǎng)的16株病人創(chuàng)面分泌物、痰液的MRSA或A.baumannii菌株、4株空氣中MRSA或A.baumannii菌株、6株床墊上的MRSA或A.baumannii菌株分別進(jìn)行同源性

10、分析。
　　結(jié)果：分離自燒傷病房的不同患者創(chuàng)面分泌物、痰液、空氣以及床墊中的MRSA菌株為同一基因型或相似基因型,A.baumannii菌株均為同一基因型。
　　結(jié)論：通過(guò)ERIC-PCR檢測(cè)出來(lái)源于不同患者創(chuàng)面、痰液、病房空氣以及床墊的MRSA或A.baumannii為相似或同一基因分型,表明燒傷科病房周?chē)h(huán)境與病人之間存在交叉感染的風(fēng)險(xiǎn)。需要加強(qiáng)院內(nèi)感染監(jiān)測(cè),教育醫(yī)護(hù)人員及新職工工作中加強(qiáng)無(wú)菌觀念,需進(jìn)行燒傷科專(zhuān)科崗前培