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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:實(shí)驗(yàn)通過(guò)培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的HUVECs,探討GLP-1是否干預(yù)AGEs誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及其機(jī)制。
方法:無(wú)菌培養(yǎng)HUVECS,選擇生長(zhǎng)良好的第3-5代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)分為:①正常對(duì)照組;②AGEs(200ug/ml)組;③GLP-1(100nmol/l)組;④AGEs(200ug/ml)+GLP-1(100nmol/l)組。分別培養(yǎng)48h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)
2、細(xì)胞凋亡率;Western Blot測(cè)定細(xì)胞p-Akt、p-eNOS水平;NO試劑盒檢測(cè)NO濃度。
結(jié)果:
1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,AGEs組顯著增加HUVECs的凋亡率(P<0.05);與AGEs+GLP-1組相比,AGEs組顯著增加HUVECs的凋亡率(P<0.05);與對(duì)照組相比,GLP-1組的凋亡率無(wú)顯著差異(P>0.05)。
2.一氧化氮濃度測(cè)定結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,AGEs組
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中產(chǎn)生的NO的量明顯下降(P<0.05);與AGEs+GLP-1組相比,AGEs組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中產(chǎn)生的NO的量明顯下降(P<0.05);與對(duì)照組相比,GLP-1組NO的產(chǎn)量無(wú)明顯改變(P>0.05)。
3. Western Blot結(jié)果示:與對(duì)照組相比,AGEs組P-AKt蛋白及P-eNOS蛋白的含量均明顯下降(P<0.05);與AGEs+GLP-1組相比,AGEs組P-AKt蛋白及P-eNOS蛋白的含量均明顯
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