杜仲藥物微囊兩種制備方法比較的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：磷酸鈣骨水泥材料作為組織工程支架已成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)，但是，自固化的鈣磷骨水泥支架存在利于成骨細(xì)胞長(zhǎng)入的多孔結(jié)構(gòu)不夠及骨誘導(dǎo)活性不足等問題。杜仲是中藥材，研究表明杜仲葉提取物對(duì)成骨細(xì)胞的增殖具有明顯的促進(jìn)作用。設(shè)想在可自固化鈣磷骨水泥支架中加入載有杜仲提取物的高分子微膠囊材料，緩慢釋放杜仲提取物，將可能促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖分化，從而提高支架材料的骨誘導(dǎo)性。 目的：本研究用噴霧干燥法和靜電法分別制備成阿拉伯膠杜仲微囊和殼

2、聚糖—海藻酸鈉杜仲微囊，并對(duì)兩種微囊的結(jié)構(gòu)及性能進(jìn)行比較。 方法： 一．噴霧干燥法制備杜仲微囊。 1．預(yù)處理：將壁材(阿拉伯膠和β—環(huán)狀糊精混合物配比1：1)配成溶液，稱取適量杜仲提取物，用少量酒精溶解后，與壁材溶液按照1/10混合，將溶液加熱至60℃左右，經(jīng)高壓均質(zhì)處理。 2．篩選微囊制備條件：按照進(jìn)料流量，進(jìn)風(fēng)溫度，進(jìn)料固形物濃度不同每組分別設(shè)立5種制備條件，對(duì)均質(zhì)的預(yù)處理物溶液進(jìn)行噴霧干燥，測(cè)定其微

3、囊化效率，從中篩選形成微囊的最佳噴霧干燥條件。 二．靜電法制備杜仲微囊。 1．微囊制備過(guò)程：將杜仲提取物置于燒杯中，加入1.5％海藻酸鈉水溶液，在磁力攪拌器上振蕩混勻，所得混懸液用靜電微囊發(fā)生器滴加到慢速攪拌的殼聚糖的2％醋酸溶液(含少量CaCl2)中，繼續(xù)攪拌30min，過(guò)濾，水洗，得白色微囊。冷凍或50℃干燥收集微囊。 2．篩選微囊制備條件：實(shí)驗(yàn)分為3大組，A組：1.5％海藻酸鈉、1.0％殼聚糖、1.5％氯化

4、鈣條件不變，按海藻酸鈉與芯材質(zhì)量比不同分5小組：0.5，1.0，1.5，2.0，2.5；B組：海藻酸鈉與芯材質(zhì)量比為1.5、海藻酸鈉1.5％、氯化鈣1.5％條件不變，按殼聚糖濃度不同分4組，分別為0.5％，1.0％，1.5％，2.0％；C組：海藻酸鈉與芯材質(zhì)量比為1.5、海藻酸鈉1.5％、殼聚糖1.0％條件不變，按氯化鈣濃度不同分5組，分別為0．4％，0.6％，0.8％，1.0％，1.2％。靜電法制備微囊，測(cè)定其載藥量和包埋率，篩選最佳

5、的制備微囊條件。 三．取噴霧干燥法和靜電法的最佳制備條件下制備的杜仲微囊相比較。 1．兩種不同方法制備的杜仲微囊表觀形貌比較。 肉眼觀察微囊色澤，利用光學(xué)顯微鏡和掃描電子顯微鏡觀察并比較不同方法制得的微囊表面結(jié)構(gòu)。a．光學(xué)顯微鏡觀察：取微膠囊產(chǎn)品分散在無(wú)水乙醇中，超聲波震蕩后，滴加在載玻片上觀察。b．掃描電子顯微鏡觀察：在SEM樣品臺(tái)上貼上一層雙面膠，將微膠囊粉末撒于此雙面膠上，輕輕吹去多余的粉末，觀察其表面超微

6、結(jié)構(gòu)。 2．兩種不同方法制備的杜仲微囊粒徑及分布比較。 顯微鏡法分析法：在每個(gè)樣品中隨機(jī)選取50個(gè)微囊，置于載玻片上，用顯微鏡上的游標(biāo)卡尺測(cè)量微囊直徑d(um)。計(jì)算微囊的平均粒徑和粒徑偏差，并比較兩種方法制得的微囊尺寸大小及粒徑分布情況。 3．兩種不同方法制備的微囊的緩釋性能比較。 采用溶出度測(cè)定儀測(cè)定各組杜仲微囊在磷酸緩沖溶液釋放介質(zhì)中的累積釋藥率，比較兩種方法制得的微囊的緩釋性能。 結(jié)果：

7、 1．噴霧干燥法：最佳工藝條件為進(jìn)料固形物濃度為30％，進(jìn)風(fēng)溫度為150℃，進(jìn)料速度為25ml/min。微膠囊化效率為93.8％．干燥的杜仲微膠囊為黃色固體粉末，無(wú)不良?xì)馕?，分散性和穩(wěn)定性均佳。微囊外觀圓整，干燥后微囊表面光滑，無(wú)明顯微孔褶皺。粒度均勻，分布較窄。測(cè)得杜仲微囊的平均粒徑為50.40±2.34um。體外釋放試驗(yàn)顯示，在釋放介質(zhì)中杜仲提取物原粉2小時(shí)內(nèi)累積釋放率達(dá)90％，而杜仲微囊8小時(shí)累積釋放率為63％。 2

8、．靜電法：最佳的制備工藝條件為海藻酸鈉與芯材質(zhì)量比為1.5，殼聚糖濃度1.0％，氯化鈣濃度1.5％。杜仲微囊平均載藥率為15.14％，包埋率為73.21％。杜仲微膠囊為白色球狀，外層為半透膜，內(nèi)部為含藥內(nèi)核。干燥后為白色至淡黃色固體粉末，無(wú)不良?xì)馕?，具有較好分散性和穩(wěn)定性．微囊球形圓整，表面較光滑。冷凍干燥后微囊表面不光滑，有凹凸，但球形完整。粒徑基本上分布在195～205um之間，分布很窄，測(cè)得微囊的平均粒徑為200.13±2.21u

9、m。體外釋放試驗(yàn)顯示，在釋放介質(zhì)中杜仲提取物原粉2小時(shí)內(nèi)累積釋放率達(dá)90％，而杜仲微囊8小時(shí)累積釋放率為68％。 結(jié)論：在表觀形貌方面噴霧干燥法得到微囊表面較光滑，靜電法得到的微囊表面較粗糙，有凹凸。靜電法得到的微囊強(qiáng)度不高，相對(duì)易變形。兩種方法得到的微囊粒徑分布均較窄。但靜電法得到的微囊粒徑更均勻，噴霧干燥法得到微囊粒徑較靜電法小。在緩釋性能方面兩種方法制備的微囊都具有較好的緩釋作用，但靜電法制得的微囊釋放速率較噴霧干燥法快，