構(gòu)建Ar與Cc亞基因組導(dǎo)入的甘藍(lán)型油菜(Brassica napus)導(dǎo)入系群體.pdf

1、本課題組已通過大規(guī)模的種間雜交、分子標(biāo)記輔助選擇、多代自交，選育出了系譜各異的第三代新型甘藍(lán)型油菜(ArArCcCc)自交系，它們導(dǎo)入了大量的白菜型油菜Ar和埃塞俄比亞芥Cc亞基因組片段，具有豐富的表型變異，并與常規(guī)甘藍(lán)型油菜（B.napus，AnAnCnCn）雜交后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的亞基因組間雜種優(yōu)勢。本課題在此基礎(chǔ)上，擬通過一次雜交和多輪回交，將第三代新型甘藍(lán)型油菜自交系的基因組片段，導(dǎo)入到常規(guī)甘藍(lán)型油菜的遺傳背景中，從而建立起新型甘藍(lán)

2、型油菜的導(dǎo)入系群體，為開展進(jìn)一步的遺傳研究提供試驗材料。
　　為了在碩士生研究階段（三年時間的四個年度）構(gòu)建出需五輪交配才能形成的導(dǎo)入系群體，本研究采取了邊交配、邊研究、邊選擇，同時輔以夏繁的策略，構(gòu)建春性、冬性導(dǎo)入系群體。具體構(gòu)建過程如下:
　　第一年(2013.7-2013.12)，新型甘藍(lán)型油菜與常規(guī)甘藍(lán)型春油菜雜交得到F1，評估其田間雜種優(yōu)勢，并用5對SSR引物從48個F1植株中鑒定出46個真雜種。
　　第二年

3、(2014.1-2014.12)，低世代回交群體(BC1F1和BC2F1)的構(gòu)建，以及用6對SSR引物從354個BC1F1植株中鑒定出260個真雜種。我們用3，067個SNP標(biāo)記分析了特異性外源Ar/Cc的含量、遺傳距離，同時進(jìn)行產(chǎn)量試驗評估，最終確定了2個新型甘藍(lán)型油菜（13R066和13R113）用于構(gòu)建春油菜導(dǎo)入系群體。
　　第三年(2015.1-2015.12)，對BC2F1群體進(jìn)行基因型分析發(fā)現(xiàn)新型甘藍(lán)型油菜的導(dǎo)入是覆蓋

4、全基因組的，同時完成了對BC3F1群體的構(gòu)建。
　　第四年(2016.1-2016.6)，構(gòu)建了以常規(guī)甘藍(lán)型春油菜為輪回親本的BC4F1群體與BC3F2群體。
　　經(jīng)過1次雜交、4輪回交（或3輪回交1次自交），已構(gòu)建出兩個春油菜導(dǎo)入系群體:13R066-BC4F1和13R113-BC3F2。
　　冬油菜導(dǎo)入系群體的構(gòu)建與春油菜同期進(jìn)行。由于冬油菜的冬性較強(qiáng)需要較長時間的低溫才能通過春花，所以冬油菜導(dǎo)入系群體的構(gòu)建比春油

5、菜導(dǎo)入系群體的構(gòu)建晚一個世代。經(jīng)過1次雜交、3輪回交（或2輪回交1次自交），初步構(gòu)建出兩個冬油菜導(dǎo)入系群體:13R143-BC3F1和13R172-BC2F2。
　　我們通過篩選出農(nóng)藝性狀優(yōu)良并含有大量外源亞基因組導(dǎo)入的新型甘藍(lán)型油菜自交系，與常規(guī)的春、冬性甘藍(lán)型油菜雜交，并以常規(guī)甘藍(lán)型油菜為輪回親本，多次回交，通過分子標(biāo)記輔助選擇，創(chuàng)建出了包含有不同Ar、Cc亞基因組片段導(dǎo)入的春、冬性甘藍(lán)型油菜導(dǎo)入系群體，為進(jìn)一步解析外源亞基因