海參及海參巖藻聚糖硫酸酯對小鼠黏膜免疫的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、化療藥物,如環(huán)磷酰胺,是腫瘤治療中的常用藥,具有殺滅腫瘤細(xì)胞的功效,但同時會將機(jī)體內(nèi)增殖迅速的正常細(xì)胞(如胃腸道、呼吸道黏膜細(xì)胞)殺滅,損傷機(jī)體黏膜免疫功能。臨床上利用藥物治療黏膜免疫損傷存在一定局限性。食源性物質(zhì)具有多種功效,幾乎無毒性,且直接接觸消化道黏膜起作用,因而成為黏膜免疫保護(hù)物質(zhì)的首選。海參是一種珍貴的海洋生物資源,具有悠久的研究歷史。海參中含有海參多糖、皂苷、活性肽、磷脂等多種生物活性物質(zhì),被證實(shí)具有多種生理活性,如提高機(jī)

2、體免疫力、抗腫瘤、抗凝血、改善脂質(zhì)代謝等。本文的主要研究目的是探討海參及海參活性物質(zhì)之一(海參巖藻聚糖硫酸酯)對環(huán)磷酰胺所致黏膜免疫損傷的保護(hù)作用,為完善海參營養(yǎng)評價體系提供技術(shù)支撐,并為開發(fā)以海參多糖為功效因子的功能性食品提供理論依據(jù),促進(jìn)海洋生物資源的深度開發(fā)利用。
　　本論文主要包括三部分內(nèi)容:
　　第一部分:研究四種常見海參對小鼠腸道黏膜免疫的調(diào)節(jié)作用。采用環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)腸道黏膜免疫損傷動物模型,分別灌胃仿刺參、梅花參

3、、美國肉參、海地瓜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。通過檢測腸道黏膜免疫相關(guān)指標(biāo)對海參的腸道黏膜免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行評價。研究結(jié)果顯示,環(huán)磷酰胺對小鼠腸道黏膜免疫功能造成明顯損傷,而海參的前期攝入可以起到改善作用,具體表現(xiàn)包括:增加免疫器官指數(shù),提高機(jī)體整體免疫水平;提高絨毛長度及絨毛長度/隱窩深度(V/C)值,恢復(fù)小腸組織正常結(jié)構(gòu)形態(tài)及綜合功能狀態(tài);調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子IFN-γ及IL-4的分泌,改善黏膜Th1/Th2平衡狀態(tài),維持黏膜免疫平衡;促進(jìn)腸道黏膜免疫效應(yīng)

4、因子SIgA分泌,增強(qiáng)腸道黏膜免疫功能。此外,四種海參中以仿刺參和梅花參的作用效果較為明顯,提示與其較高的多糖含量相關(guān)。
　　第二部分:研究食用海參對小鼠呼吸道黏膜免疫的調(diào)節(jié)作用。參照人體食用海參的方式及劑量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。采用環(huán)磷酰胺制備呼吸道黏膜免疫損傷動物模型,檢測呼吸道黏膜固有免疫及獲得性免疫因子變化情況,并初步探討機(jī)理。結(jié)果顯示,食用海參能夠改善環(huán)磷酰胺造成的呼吸道黏膜免疫損傷,具體表現(xiàn)為:明顯改善環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的溶解酶表達(dá)

5、量下降,提高固有免疫作用;有效促進(jìn)支氣管肺泡中的SIgA含量,改善獲得性免疫功能。進(jìn)一步研究表明,海參的前期攝入可以通過促進(jìn)呼吸系統(tǒng)中IgA與pIgR的高表達(dá),從而提高呼吸道SIgA的分泌水平,達(dá)到改善呼吸道黏膜免疫功能的作用。
　　第三部分:研究海參巖藻聚糖硫酸酯及其酶解產(chǎn)物對小鼠腸道黏膜免疫的調(diào)節(jié)作用。首先,檢測腸道黏膜免疫相關(guān)指標(biāo),對海參巖藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)及酶解產(chǎn)物的腸道黏膜免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行評價。結(jié)果顯示,SC-

6、FUC及酶解產(chǎn)物可以通過提高免疫器官指數(shù);恢復(fù)小腸組織形態(tài)及綜合功能狀態(tài);調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子分泌,維持黏膜免疫平衡;促進(jìn)腸道黏膜免疫抗體IgA高表達(dá)來增強(qiáng)腸道黏膜免疫功能。其次,針對不同分子量SC-FUC的作用效果差異,探討其與海參多糖消化吸收效率之間的關(guān)系。結(jié)果顯示,SC-FUC分子量越低,在實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)的消化吸收效果越好。因此推測不同分子量SC-FUC的作用效果差異可能與其消化吸收效率相關(guān)。最后,對SC-FUC促進(jìn)腸道IgA高表達(dá)的機(jī)

7、理進(jìn)行探究。研究發(fā)現(xiàn),SC-FUC能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用,并通過促進(jìn)巨噬細(xì)胞 Toll樣受體(TLRs)高表達(dá),激活NF-κB信號通路,刺激細(xì)胞因子IL-6,IL-10表達(dá)量升高,從而增加腸道IgA表達(dá)水平,提高腸道黏膜免疫功能。
　　綜上所述,海參及海參巖藻聚糖硫酸酯能夠?qū)Νh(huán)磷酰胺造成的小鼠黏膜免疫功能損傷起到改善作用。其中,海參以多糖含量較高的海參品種(仿刺參和梅花參)效果較好,海參巖藻聚糖硫酸酯以酶解成恰當(dāng)?shù)头肿恿?5