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文檔簡介
1、從3種石杉科植物華南馬尾杉、有柄馬尾杉及蛇足石杉的不同組織器官中分離獲得127株內生真菌。運用已構建的菌種發(fā)酵及生物堿篩選條件,從127株內生真菌中篩選出28株可能產生物堿的內生真菌。以28株可能產生物堿的內生真菌為出發(fā)菌株,通過乙酰膽堿酯酶抑制劑篩選模型,從中篩選出10株產乙酰膽堿酯酶抑制劑的內生真菌。運用溴甲酚綠酸性染料法分析表明,不同菌株發(fā)酵液中生物堿的含量不同,其中以菌株YS-02的吸光值最大,YS-13次之。在此基礎上,結合H
2、PLC法及LC-MS法,從中篩選出2株產生與宿主相同的活性成分石杉堿甲的內生真菌YS-02和YS-13,其產量分別為26.4μg/L和21.0μg/L,經形態(tài)學和rDNA-ITS序列分析,初步鑒定YS-02菌為炭角菌目(Xylariales)內生真菌,YS-13為纖姿擬青霉(Paecilonmyces tennis),這兩株菌發(fā)酵產石杉堿甲尚屬首次報道。通過自動生物發(fā)酵罐培養(yǎng)技術完成了纖姿擬青霉YS-13的擴大培養(yǎng)的初步研究,發(fā)酵產物分
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